凝胶色谱分离技术“黄冈赛”一等奖.pptxVIP

生物技术及应用专业教学资源库4.4 凝胶色谱分离技术4.色谱分离技术 基本原理 1 凝胶色谱法的特点 2 凝胶过滤介质 3 凝胶色谱法的操作方法 4 凝胶色谱法的应用 5 凝胶色谱分离技术 凝胶过滤色谱又称分子筛或排阻色谱。 以各种多孔凝胶为固定相，根据溶液中各组分相对分子质量（分子大小）差异而分离的一种液相色谱技术。 凝胶颗粒是一种不带电荷的具有三维空间的多孔网状结构的物质。凝胶色谱分离技术 利用凝胶对大小不同的分子流动产生的阻滞作用不同而分离的色谱方法。 基本原理 基本原理 大分子物质 直径较大→不能进入凝胶颗粒的微孔→流程短→先流出小分子物质 直径较小→能进入凝胶颗粒的微孔→流程长→后流出中等大小分子物质 直径居中→介于二者之间 凝胶色谱法的特点凝胶色谱法的优点1.操作简单易行，凝胶不用再生、可反复使用，所需设备简单。2.凝胶为不带电荷的惰性物质，不会使物质变性、适用于不稳定的化合物。3.洗脱容易，分离条件缓和。4.分离效果好，重复性高。5.应用范围广，分离分子量的覆盖面大。 凝胶色谱法的特点凝胶色谱法的缺点1.处理量小。2.分辨率不高。3.分离速度较慢。 理想的凝胶过滤介质具有高物理强度及化学稳定性，能够耐受高温高压和强酸强碱，具有高化学惰性，内孔径分布范围窄，珠粒颗粒大小均一度高。 目前，常用的有葡聚糖