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基因结构及其对基因操作的影响第1页/共23页 DNA—基因发展简史1847年Schleiden 和 Schwann提出“细胞学说” 生命的基本单位。1864-1910年 孟德尔、摩根提出遗传单位，形状与基因相关联。1936年 Sumner 证实酶是蛋白质。1944年 提出了DNA是遗传信息的载体。1953年 Watson和Crick提出DNA双螺旋结构。1954年Crick提出遗传信息传递规律（中心法则）1958年Meselson提出DNA半保留复制。1965年Jacob和Monod提出操纵子（operon）模型，DNA遗传信息从mRNA到蛋白质。1969年美国科学家Nirenberg破译了DNA遗传密码。1980年Sanger设计出测定DNA分子内核苷酸序列的方法。1993年Mullis发明了PCR仪2000年-2002年测定人类基因组核苷酸序列为30亿bp，基因为3万多个第2页/共23页 一 基因的概念（一）基因：通常也叫“顺贩子”，是遗传的基本单位，它携带着某种RNA分子或蛋白质分子的遗传信息。从本质上，基因是一段具有特殊功能的连续的脱氧核糖核苷酸序列，是构成巨大遗传染色体的组成成份。第3页/共23页 第4页/共23页 一 基因的概念（二）基因是什么著名的肺炎球菌实验1928年，英国 Griffith S型肺炎球菌：有荚膜，菌落表面光滑R型肺炎球菌：没有荚膜，菌落表面粗糙第5页/共23页 一 基因的概念结果说明：加热杀死的S型肺炎球菌中一定有某种特殊的生物分子或遗传物质，可以使无害的R型肺炎球菌转化为有害的S型肺炎球菌这种生物分子或遗传物质是什么呢？纽约洛克非勒研究所 从加热杀死的S型肺炎球菌将蛋白质、核酸、多糖、脂类分离出来，分别加入到无害的R型肺炎球菌中结果发现，惟独只有核酸可以使无害的R型肺炎球菌转化为有害的S型肺炎球菌。 结论：DNA是生命的遗传物质第6页/共23页 更有说服力的噬菌体实验 195年，Hershey和Chase 病毒（噬菌体）放射性同位素35S标记病毒的蛋白质外壳，32P标记病毒的DNA内核，感染细菌。新复制的病毒，检测到了32P标记的DNA，没有检测到35S标记的蛋白质，DNA在病毒和生物体复制或繁殖中的关键作用。第7页/共23页 二 DNA的结构（一）DNA的组成与结构 碱基：腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胸腺嘧啶（T）、胞嘧啶（C） 核糖：脱氧核糖 磷酸第8页/共23页 第9页/共23页 第10页/共23页 DNA双螺旋模型第11页/共23页 （二） DNA的复制DNA的半保留复制DNA合成的同位素示踪实验1958，Meselson和Stahl 大肠杆菌 15NH4CI为唯一氮源的培养液中生长若干代被15N标记的大肠杆菌转入14NH4CI为唯一氮源的培养液中完成第一代和第二代繁殖时，分离DNA，密度梯度超速离心被15N标记的亲代双链DNA（记作15N/15N）密度大，在下部；14N/14N密度小，在上部；15N/14N在15N/15N和14N/14N之间第12页/共23页 证实半保留复制的实验第13页/共23页 DNA的半保留复制DNA的复制发生在细胞周期的S期，在解旋酶的作用下，首先双螺旋的DNA可以同时在许多DNA复制的起始位点局部解螺旋并拆开为两条单链，如此在一条双链上可形成许多“复制泡”，解链的叉口处称为复制叉。第14页/共23页 DNA的半保留复制DNA的复制总是由5‘ 向3’ 方向进行DNA的半保留复制保证了所有的体细胞都携带相同的遗传信息，并可以将遗传信息稳定地传递给下一代。第15页/共23页 半保留复制A=TG=C第16页/共23页 三 基因结构及其对基因操作的影响启动子是指确保转录精确而有效地起始的DNA序列终止子位于基因3’端,给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列DNA转录和RNA翻译，即遗传信息从基因流向RNA又流向蛋白质的过程总称为基因表达 转录的起始是基因表达的关键阶段，是RNA聚合酶与启动子的相互作用。启动子的结构影响它与RNA聚合酶的亲和力，从而影响基因表达水平。第17页/共23页 第18页/共23页 三 基因结构及其对基因操作的影响（一）原核基因及其产物的共线性 基因决定蛋白质的序列组成，是由密码子对应特定氨基酸所决定的。当一个基因的核苷酸序列与其产物的氨基酸序列是一一对应时，则表明它们是共线性的。在原核生物中，基因与其产物是共线性。第19页/共23页 三 基因结构及其对基因操作的影响（二）真核基因及其产物的非共线性 20世纪70年代以来，在真核生物中发现了间断基因（interrupted gene），后来