新冠基因检测 RNA提取流程图.docxVIP

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新冠基因检测 RNA提取流程图 注:A:洗涤液W按照要求加入无水乙醇B:助沉剂加入350ul洗脱液震荡溶解后4度保存 注:A:洗涤液W按照要求加入无水乙醇 B:助沉剂加入350ul洗脱液震荡溶解后4度保存 取 取EP管每人份加入1ul内标,6ul助沉剂,20ul磁珠,500ul结合缓冲液 加入 加入 140 μl样本,至上述试剂中,注意样本震荡混匀。震荡10s或者反复颠倒10次(注意磁珠完全悬浮)静置3分钟。 移液器调至700ul,把上述混合液全部转移至亲和柱中,13000rpm,60s。 移液器调至700ul,把上述混合液全部转移至亲和柱中,13000rpm,60s。 加入 加入500ul洗涤液A,13000rpm,40s,用枪头吸取收集管废液;重复一次 加入 加入500ul洗涤液W(注意是否加入无水乙醇),13000rpm,15s,用枪头吸取收集管废液;重复一次 亲和柱放入离心机空离2min,13000rmp。 亲和柱放入离心机空离2min,13000rmp。 弃收集管,把吸附柱放在EP管上(注意标记)打开加入50ul洗脱液(放在65℃预热),室温放置2min。13000rpm,离心2min,弃上柱,得RNA(注意标记EP管) 弃收集管,把吸附柱放在EP管上(注意标记)打开加入50ul洗脱液(放在65℃预热),室温放置2min。13000rpm,离心2min,弃上柱,得RNA(注意标记EP管) 新冠PCR试剂配制(50人份) 从-20℃保存的试剂盒中取出PCR MIX,平缓解冻,按照 从-20℃保存的试剂盒中取出PCR MIX,平缓解冻,按照n×19ulMIX:n×1ulTaq酶的比例充分振荡混匀,然后按20ul/人份进行分装,取出所需要使用的数量,其余保存于-20℃。 把阴性对照,阳性对照,内标,转移至样本制备区,阴性对照按照样本提取方式提取。 把阴性对照,阳性对照,内标,转移至样本制备区,阴性对照按照样本提取方式提取。

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