病毒感染检查方法与防治原则.pptxVIP

病毒感染检查方法与防治原则;教学要求;第一节 病毒感染的检查;病毒感染的检查*;一、标本的采集与送检;二、病毒的分离与鉴定;二、病毒的分离与鉴定;（一）病毒的分离培养 1.细胞培养 单层细胞培养（monolayer cell culture） 分类 悬浮细胞培养（suspended cell culture） 原代细胞（primary cell） 细胞种类 二倍体细胞（diploid cell） 传代细胞系（continuous cell line）; ?????????????????????????????????????????????????????????????????? 黄祯祥院士：首创病毒体外培养法新技术，为现代病毒学奠定了基础，被称为“在医学病毒学的发展史上第二次技术革命”；第一次使病毒定量测定的显微镜观察法被革新为肉眼观察法。 ;第9页/共45页;病毒的细胞培养;1.细胞培养;特点：①对多种病毒敏感 ②生长能力有限, 获取成本高 ③可携带潜伏病毒;;;2.鸡胚培养 采用孵化9～14天的鸡胚 绒毛尿囊膜 痘苗病毒、人类疱疹病毒 尿囊腔 接种部位 流感病毒、腮腺炎病毒 羊膜腔 流感病毒的初次分离 卵黄囊 嗜神经病毒 ;第16页/共45页;第17页/共45页;3.动物接种 应用：尚无敏感细胞的病毒培养 动物：兔、鼠、黑猩猩、猴等 优点：结果易观察，可建立动物模型 缺点：有饲养条件要求，费用高，动物 体内常带有潜伏病毒;1．病毒增殖鉴定* (1)细胞病变效应*（cytopathic effect, CPE ） ①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等（多数病毒）； ②形成多核巨细胞或称融合细胞（麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等）； ③在培养细胞中形成包涵体（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。 ;第20页/共45页;①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落;麻疹病毒感染细胞;③形成包涵体(inclusion body);腮腺炎病毒感染细胞;红细胞吸附现象;(3)干扰现象（interference）;(4)细胞代谢改变* 细胞代谢变慢 pH变化减慢 (5)细胞的病毒标记*:免疫荧光/酶标技术等 (6)病毒核酸*:PCR等;2.病毒形态学鉴定;3.病毒血清学鉴定;(2)免疫标记法（FIA、EIA、RIA） ——多种病毒鉴定 (3)凝胶免疫扩散试验(gel immuno- diffusion test) ——多种病毒鉴定;4.病毒分子生物学鉴定;;(四) 新病毒的鉴定;三、病毒感染的血清学诊断;1.中和试验（neutralizing test）;2.补体结合试验 （complement fixation test）;四、病毒感染的快速诊断;（一）形态学检查;（二）病毒成分检测;（三）早期抗体检测;第二节 病毒感染的特异性预防;灭活疫苗（inactivated vaccine） 活疫苗（living vaccine） 重组载体疫苗（recombinant carrier vaccine） 亚单位疫苗（subunit vaccine） 化学提取或人工合成疫苗 重组疫苗（recombinant vaccine） 核酸疫苗（nucleic acid vaccine）;二、人工被动免疫常用生物制品;第三节 病毒感染的治疗;感谢您的欣赏