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;;;;;拓展延伸;2.DNA重组技术的基本工具
(1)限制性核酸内切酶(也称“限制酶”);(2)DNA连接酶;(3)载体;(1)源于选修3 P4“寻根问底”
①原核生物中存在限制酶的作用是什么?;(2)源于选修3 P6“寻根问底”:DNA连接酶和DNA聚合酶 (填“是”或“不是”)一回事。原因是:①DNA连接酶连接的是_____
__________,而DNA聚合酶是把单个的_____________连接到已有的DNA片段上。②___________起作用时需要以一条DNA链为模板,而____________不需要模板。;延伸应用;延伸应用;考向一 限制酶和DNA连接酶
1.下表为常用的限制性核酸内切酶(限制酶)及其识别序列和切割位点,由此推断以下说法中,错误的是;A.Hind Ⅱ、Sma Ⅰ两种限制酶切割后形成平末端
B.Sau3A Ⅰ限制酶的切割位点在识别序列的外部
C.BamH Ⅰ和Sau3A Ⅰ两种限制酶切割后形成相同的黏性末端
D.一种限制酶一定只能识别一种核苷酸序列;Hind Ⅱ、Sma Ⅰ两种限制酶沿着中轴线切口切开,切割后形成平末端,A项正确;
Sau3A Ⅰ限制酶识别GATC序列,切割位点在识别序列的外部,B项正确;
BamH Ⅰ限制酶识别GGATCC序列,Sau3A Ⅰ限制酶识别GATC序列,切割后形成相同的黏性末端GATC,C项正确;
Hind Ⅱ能识别GTCAAC,也能识别GTTAAC,D项错误。;2.(2023·河北沧州高三模拟)限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶,下列说法正确的是
A.DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键
B.限制酶只能切割双链DNA片段,不能切割烟草花叶病毒的核酸
C.大多数限制酶的识别序列由5个核苷酸组成
D.限制酶主要从原核生物中分离纯化而来,所以也能剪切自身的DNA;DNA连接酶连接的是两个DNA片段,A错误;
限制酶只能切割双链DNA片段而不能切割RNA,烟草花叶病毒的核酸为RNA,B正确;
大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成,C错误;
限制酶主要从原核生物中分离纯化而来,但是因为原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰,所以限制酶不能剪切自身的DNA,D错误。;考向二 基因工程载体的应用
3.质粒是基因工程最常用的载体,下列有关质粒的说法正确的是
A.质粒不仅存在于细菌中,也存在于某些病毒中
B.细菌的基因只存在于质粒上
C.质??为小型环状DNA分子
D.质粒是基因工程中的重要工具酶之一;病毒中不含质粒,A错误;
细菌基因主要存在于拟核DNA上,也有少数存在于质粒上,B错误;
质粒为小型环状DNA分子 ,存在于细胞核外或拟核外的细胞质基质中,C正确;
质粒是基因工程中的重要工具之一,但不是工具酶,D错误。;4.下列有关基因工程中载体的说法,正确的是
A.在进行基因工程操作中,被用作载体的质粒都是天然质粒
B.所有的质粒都可以作为基因工程中的载体
C.质粒是一种独立于细菌染色体外的链状DNA分子
D.作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因;在进行基因工程操作中,被用作载体的质粒是在天然质粒的基础上进行过人工改造的,A错误;
具有一至多个限制酶切点、具有标记基因的质粒才可以作为基因工程中的载体,B错误;
质粒是一种独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外的环状DNA分子,C错误;
作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因,而且能在受体细胞中复制并稳定保存,D正确。;;1.目的基因的获取
(1)目的基因:主要指___________的基因,也可以是一些具有_____作用的因子。
(2)获取目的基因的方法;②利用____技术扩增目的基因;③用_____方法直接人工合成;归纳总结;归纳总结;归纳总结;归纳总结;归纳总结;归纳总结;易错提醒;易错提醒;易错提醒;2.基因表达载体的构建——基因工程的核心
(1)目的:使目的基因___________________________________________,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。
(2)基因表达载体的组成及作用;(3)构建过程;易错提醒;3.将目的基因导入受体细胞;转化过程;辨析;辨析;4.目的基因的检测与鉴定;考向一 目的基因的获取
5.如图表示基因工程中获取目的基因的示意图,下列相关叙述不正确的是
A.③表示PCR技术,用来扩增目
的基因
B.若获取的目的基因相同,则图
中基因组文库小于cDNA文库
C.要从基因文库中得到所需的目的基因可以根据目的基因的相关信息来获取
D.若基因比较小,核苷酸序列又已知,可以通过化学方法直接人工合成获取;;6.(2023·辽宁盘锦高三检测
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