认识色谱分离工艺流程.pptx

模块十一 新型分离技术 03任务三 认识色谱分离技术 03任务三 认识色谱分离技术3 学习目标：（1）学习色谱分离设备的结构、工艺流程和工作原理；（2）会操作色谱分离设备；（3）能够分析、判断和解决色谱分离生产中发生的生产问题。 03任务三 认识色谱分离技术4 色谱分离法又称层析法： 它利用不同组分在两相中物理化学性质（如吸附力、分子极性和大小、分子亲和力、分配系数等）的差别，通过两相不断的相对运动，使各组分以不同的速率移动，而将各组分分离。 03任务三 认识色谱分离技术5能力目标学习要求与目标1. 具有根据生产工艺条件选择色谱分离过程的能力知识目标1.掌握凝胶色谱分离工艺流程。2.掌握离子交换色谱工艺流程。3.掌握亲和色谱工艺流程。素质目标1.培养诚实守信、团结协作、爱岗敬业精神；2.培养安全、环保、健康生产意识；3.培养严谨的工作态度及质量意识，具备工程管理能力；4.培养分析问题和解决问题的能力；5.创新能力培养等。子任务2 认识色谱分离工艺流程 03任务三 认识色谱分离技术子任务2 认识色谱分离工艺流程6一、认识凝胶过滤色谱分离工艺流程（一）凝胶过滤色谱的基本原理 凝胶过滤层析的分离过程是在装有多孔物质(交联聚苯乙烯、多孔玻璃、多孔硅胶等)作为填料的柱子中进行的。填料的颗粒有许多不同尺寸的孔，这些孔对溶剂分子而言是很大的。故它们可以自由扩散出入。如果溶质分子也足够小，则可以不同程度地往孔中扩散，同时还做无定向的运动。大的溶质分子只能占有数量比较少的大孔，较小的溶质分子则可以进入一些尺寸较小的孔中，所以溶质的分子越小，可以占有的孔体积就越大。比凝胶孔大的分子是不能进入凝胶的孔内，只能通过凝胶颗粒之间的空隙，随流动相一起向下流动，首先从层析柱中流出。所以整个样品就按分子的大小依次流出层析柱，谱图上也就依次出现了不同分的色谱峰了。 03任务三 认识色谱分离技术71凝胶过滤层析过程主要是在凝胶过滤层析介质内完成，而这一凝胶过滤层析介质是装填在某一设备内，称为凝胶柱或层析柱，通入需要分离的物质时，不同大小的分子在通过层析柱时，每个分子都要向下移动，同时还做无定向的扩散运动；2比凝胶层析过滤介质大的分子不能进入凝胶过滤介质的孔内，大分子只能通过凝胶过滤介质颗粒之间的空隙，随流动相一起向下移动，首先从层析柱中流出，在分离图谱上是最先出现的峰；3比凝胶过滤介质孔径小的分子，有的能进入部分孔道，更小的分子则能自由地扩散进入凝胶过滤介质的孔道内，这些小分子由于扩散效应，不能直接通过凝胶过滤介质的空隙而流出，其流出层析柱的速度滞后于大分子，且是依据分子的大小依次流出层析柱，谱图上出现的色谱峰在大分子峰的后面。 03任务三 认识色谱分离技术8（二）凝胶过滤色谱分离设备和工艺流程 凝胶过滤色谱设备比较简单，在实验室里用的凝胶层析过滤设备是作为分析设备使用。 如图所示为实验室里测定核酸、蛋白质的凝胶层析过滤设备。 需要测定的溶液在一定的压力下通过层析柱，根据其分子量的大小依次流出层析柱，在7的检测仪中可以直接检测出核酸或蛋白质的含量。 03任务三 认识色谱分离技术9 典型的SN-01凝胶色谱分析仪及其流程，从贮液瓶出来的溶剂经加热式除气器除去所溶的气体后进入柱塞泵，由泵压出的溶剂再经一个烧结不锈钢过滤器，进入参比流路和样品流路。在参比流路中，溶剂经参比柱、示差折光检测仪的参比池进入废液瓶；在样品流路中，先经六通进样阀将配好的试样送入色谱柱，样品经色谱柱分离后经示差折光检测器的样品池，进入虹吸式体积标记器。示差折光检测器将浓度检测信号输入记录仪，记录纸上记录的是反映被测物质的分子量分布的凝胶色谱图。 03任务三 认识色谱分离技术10 03任务三 认识色谱分离技术11 如图所示分离不同的蛋白质的凝胶过滤层析设备，依据分子量的大小将不同的蛋白质分离开来。 凝胶过滤层析测定蛋白质 03任务三 认识色谱分离技术12 （1）工业用不锈钢中压凝胶过滤层析设备 根据要分离的（植物有效成分、化工中间体、化合物等）在通过装于层析柱内的凝胶过滤层析介质时，分离成不同的成分，从而得到的有效组成或成分，对于制备高效药、小剂量的中药、植物有效成分、化学中间体等产品是非常重要的精制手段。适用于高含量单体的分离、中药中杂质的清除地精制、化工中间体、合成产品的精制、合成药单体的分离。所选用的凝胶过滤层析介质为琼酯类、聚乙烯类、多糖类等。所适用溶剂：稀酸、稀碱、有机溶剂（例：乙酸乙脂、氯仿、乙醇）。此类设备操作方便，生产成本底，工作效率高，层析柱装填方便。 03任务三 认识色谱分离技术13 （2）工业用聚乙烯凝胶过滤层析设备 层析柱为聚乙烯的凝胶过滤层析设备，适用于植物、中药有效成