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- 2023-06-08 发布于湖北
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抑郁症外周血特异lncRNAs的筛选与验证
一、研究背景
抑郁症是一种常见的心理障碍,严重影响患者的生活质量。目前尚不清楚抑郁症的发病机制,但研究表明,非编码RNA(lncRNA)在调节基因表达中起着重要作用。因此,探究抑郁症患者外周血中的特异lncRNAs可能有助于深入了解该疾病的发病机制。
二、研究方法
1. 病例选择
选择20名抑郁症患者和20名健康对照组。所有参与者均签署知情同意书,并接受调查问卷和生物样本采集。
2. RNA提取和质量检测
采集参与者外周血样本,使用RNA纯化试剂盒从血液中提取总RNA。使用NanoDrop2000光谱仪检测RNA的浓度和纯度,使用Agilent 2100生物分析仪检测RNA的完整性。
3. RNA测序
将RNA样本转录成cDNA并进行文库构建和高通量测序。对测序后的数据进行质量控制和过滤,对于符合要求的测序数据,利用Hisat2软件将其比对到GRCh38人类基因组版本。采用Rsubread软件计算基因的表达量。
4. lncRNA筛选和分析
通过比对到人类基因组来确定lncRNA的边界,使用Cufflinks软件来评定基因表达水平。使用EdgeR、DESeq2、EBSeq等不同的差异分析软件来确定差异表达的lncRNAs。对筛选出的差异表达的lncRNAs进行Gene Ontology和Kyoto Encyclopedia of Gene
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