铅离子对核桃幼苗细胞膜透性的影响.docxVIP

? ? 铅离子对核桃幼苗细胞膜透性的影响 ? ? 谭本会 李虹 摘? ?要? ?采用盆栽试验，设置不同铅离子污染浓度（100， 500， 1 000， 1 500， 2 000 mg·kg-1）的土壤作为培养基质，研究铅离子对核桃一年生幼苗叶片细胞膜透性的影响。结果表明：随着土壤中铅离子浓度的增加，核桃幼苗叶片中细胞膜的相对电导率、丙二醛及脯氨酸含量都呈现出逐渐升高的趋势，表明膜透性增大，植株受到一定程度的伤害;但与对照组比较差异不显著，说明核桃幼苗对铅离子胁迫具有抗逆性。 Key? ?核桃;铅离子;丙二醛;脯氨酸;电导率;抗逆性 ：S723.9;Q945.78? ? 文献标志码：A? ? DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2018.34.011 重金属铅作为土壤的主要污染源之一，当在土壤中积累过多时，植物通过吸收使自身的代谢发生紊乱，严重者会导致植株死亡。植物的根、茎、叶对土壤中铅离子有一定的吸收、转化和降解作用，从而使积累的污染物不会在短期内降解到环境中[1]。铅离子污染使土壤的生产力下降，使得农作物收成降低，减少种植收入，且铅离子污染最终通过食物链严重危害人类健康[2]。因此，研究铅离子对植物生长发育的影响具有重要意义。 核桃（Juglans regia L.）是世界上重要的坚果类果树和木本油料树种，果实含有黄酮、总酚、维生素E、多不饱和脂肪酸和褪黑素等多种成分，营养丰富[3];是一种集蛋白质、脂肪、纤维素、维生素等营养要素于一身的优良干果类食品，栽培的经济价值高。核桃还具有一定的药用价值[4]。核桃壳和花生壳作为生态友好材料，按照一定比例投放入轻度铅污染的土壤中，对土壤修复效果比较理想[5]。此外，核桃作为化感植物，在作物增产及病虫害防治等方面有着重要的作用[6]。 贵州省毕节市的赫章、威宁等县区由于土法炼锌等落后的生产工艺导致目前仍有大量的矿山迹地存在。研究铅离子对核桃幼苗生长过程中细胞膜透性的影响有助于进一步揭示核桃生长过程中对重金属的富集机理，为探索经果林树种在矿山迹地植被恢复中的利用提供理论依据，有利于核桃的规范化种植，从而加快毕节市核桃产业的发展。重金属铅离子对植物生理效应及生物学性状影响方面的研究较多，但主要集中于农作物和部分草本植物，对木本植物的研究相对较少[7]，有关铅离子对核桃幼苗细胞膜透性影响的研究目前未见报道。 1 材料与方法 1.1 供试苗木的选择 本试验供试的核桃幼苗为毕节市种苗站提供的一年生核桃实生苗。 1.2 铅离子胁迫处理 选用直径30 cm、高28 cm的花盆为试验栽培盆，使用无污染充分混匀的土壤作为试验盆栽的基质，每盆装无污染土9 kg（干重），下垫塑料托盘，将供试核桃幼苗除去根系原土后移植入盆，每盆栽植1株幼苗。移植后将试验盆放于正常通风、光照的地方，并进行常规浇水管理，待苗木恢复生长2个月后，选取个体、健康状况基本一致的苗木进行铅离子处理。铅离子处理是以Pb（CH3COO）2·3H2O水溶液的形式加入到基质中，形成铅离子浓度（以风干基质中含纯铅离子重量计）为100， 500， 1 000， 1 500， 2 000 mg·kg-1的污染土壤，另设不添加污染物的基质作为对照，每个处理浓度设置3个重复。所有的处理及处理后核桃幼苗的生长都在大棚内进行，保证每次都使用等量的水进行浇灌。处理90 d后随机取叶测定丙二醛、脯氨酸含量及相对电导率的变化。 1.3 相对电导率测定 随机抽取核桃幼苗叶片，每份称取0.2 g放入50 mL小烧杯中，加入蒸馏水20 mL，烧杯口用保鲜膜密封好，置于振荡锅内振荡（25 ℃，120 r·min-1）30 min后，室温下静置30 min，用DDS211A型电导仪测定每一个小烧杯中溶液的电导值，记录数据（R1）。测定之后，再一次用保鲜膜密封好小烧杯，并将其放入100 ℃的水浴锅中煮10 min，取出各个小烧杯并将其冷却至室温，测定各烧杯中溶液的电导值，记录数据（R2）。 按公式：相对电导率（%）= R1/R2×100%，计算核桃叶片的相对电导率[8]。 1.4 丙二醛（MDA）含量测定 采用二硫代巴比妥酸显色法[9]。随机抽取每一株核桃苗上的幼叶1片，用自来水、蒸馏水冲洗后，称取0.5 g叶片于研钵中，加入5 mL 5%的三氯乙酸于研钵中，将研磨后的匀浆离心（4 ℃，3 000 r·min-1）10 min。离心后取上清液2 mL于带塞的试管中，同时加入2 mL 10%的三氯乙酸（含0.5%硫代巴比妥酸），将试管置于100 ℃水浴中煮沸30 min，冷卻后离心，取上清液于450， 532， 600 nm波长下测定吸光度值。按公式：C=6.45（OD532-OD600）-0.56×OD450计算丙二醛的含量[10]，式中C为M