铅胁迫对日本免疫相关指标及组织蓄积的影响-第1篇.docxVIP

? ? 铅胁迫对日本免疫相关指标及组织蓄积的影响 ? ? 唐瑶　杜丹丹　彭东生等 Summary： 将日本[XCZ67 tif，JZ]暴露于不同浓度（0、0 025、0 05、0 5、1 0、2 5、5 0 mg/L）醋酸铅中，于处理后0、1、3、5、7、10、15、30 d 取血，测定其血清中超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性及过氧化代谢产物丙二醛含量；并于胁迫30 d测定鳃、肝胰腺、肌肉、卵巢中的铅含量，以研究铅胁迫对日本[XCZ67 tif，JZ]免疫能力及组织蓄积的影响。结果表明，在铅胁迫下，日本[XCZ67 tif，JZ]超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性均呈先增强后减弱趋势，且中高浓度铅胁迫对抗氧化酶活性的诱导速度比低浓度快。胁迫30 d，除0 025 mg/L组外，各试验组2种酶活性均显著弱于对照组，且与铅胁迫质量浓度呈显著负相关（P Key： 铅胁迫；日本[XCZ67 tif，JZ]；免疫指标；组织蓄积 ： X171 5 文献标志码： A ：1002-1302（2015）08-0336-04 近年来，由于工农业废水的大量排放导致的重金属污染问题日益突出，对生态环境安全、人类食品安全及水产养殖业构成了较大威胁 [1-3]。铅是常见的重金属污染元素之一，其在人和动物体内长期蓄积会引起慢性中毒、神经机能紊乱、贫血甚至诱发癌症 [4]。日本[XCZ67 tif，JZ]（Charybdis japonica）广泛分布于我国各海区，营底栖生活，为经济价值较高的海水养殖蟹类 [5]。关于重金属对日本[XCZ67 tif，JZ]的影响已有少量研究报道，如张红霞等分析了重金属离子对日本[XCZ67 tif，JZ]血淋巴超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响 [6]；王春琳等探讨了硫酸铜蓄积对日本[XCZ67 tif，JZ]保护酶系统的影响 [7]；苗利军等对秦皇岛海域野生日本[XCZ67 tif，JZ]等9种海产品总汞含量进行了检测 [8]。本试验研究了不同浓度铅胁迫下，日本[XCZ67 tif，JZ]血清中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性以及脂质过氧化反应产物——丙二醛含量的变化，并分析了主要器官中铅的蓄积量，旨在探讨铅对日本[XCZ67 tif，JZ]的毒性作用，为养殖水质调控、海洋环境监测及相关毒理学研究提供参考。 1 材料与方法 1 1 试验材料 日本[XCZ67 tif，JZ]于2013年10月购自江苏省连云港市高公岛海滨，采用生态闭路循环养殖系统暂养7 d，暂养条件为：盐度2 5%，pH值8 0，水温15 ℃，自然光照，连续充气，日投喂2次鲜活贝类。选择附肢完整、活性强者用于试验，甲长为（516±0 28） cm，甲宽为（6 82±0 41） cm，体质量为（7659±1764） g。 1 2 试验设计 铅源采用醋酸铅，为国产分析纯。根据GB 11607—1989《渔业 水质标准》 （铅浓度≤0 05 mg/L）以及海水通常的铅污染浓度 [9]，醋酸铅浓度设7组：对照组（0 ）、低浓度组（0 025、0 05 mg/L）、中浓度组（0 5、1 0 mg/L）和高浓度组（2 5、5 0 mg/L），每组设3个平行，每个平行随机取27只蟹，饲养30 d。水温、投饵、充气等养殖条件与暂养时相同，每天定时换水2次，每次更换水体的50%，并维持各组醋酸铅质量浓度。 1 3 试验方法 于试验后0、1、3、5、7、10、15、30 d随机抽取3只/缸蟹采集血样。用无菌注射器先吸取ACD抗凝剂 [10]1 mL，再由蟹第三步足基关节处按1 ∶ 1比例抽取血淋巴，充分混匀， 5 000 r/min 冷冻离心10 min，取上清液即为血清，-80 ℃冷冻保存。30 d采集血样后，分别将各组标本冰冻麻醉后置冰盘上解剖，取出肝胰腺、肌肉、卵巢、鳃，用预冷重蒸水（0～4 ℃）冲洗，滤纸吸干水分，-80 ℃保存。 超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性、丙二醛含量和酶液蛋白含量采用南京建成生化试剂盒及美国BioTek Snergy HT型酶标仪测定。样品中铅含量采用日本岛津AA6300型原子吸收分光光度计测定。 1 4 数据分析 所测数据采用SPSS 16 0软件进行统计分析，进行单因子方差分析（One-Way ANOVA），LSD多重比较和Duncans检验，显著水平设为α=0 05。 2 结果与分析 2 1 铅胁迫对日本[XCZ68 tif，JZ]超氧化物歧化酶活性的影响 由图1可见，在铅胁迫下，各试验组超氧化物歧化酶活性均呈先增强后减弱趋势。胁迫1 d时，除0 025 mg/L组外，各试验组超氧化物歧化酶活性均受到显著诱导（P 2 2 铅胁迫对日本[XCZ68 tif，JZ]过氧化氢酶活性的影响 胁迫1 d时，除0 025 mg/L组外，各