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生物高考复习生物科技专题系列基因工程基本内容;;04《基因工程的基本内容》;;;;;;;基因的剪刀——限制性内切酶
(简称限制酶);;;;什么叫黏性末端?;;要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性末端?;基因的针线:DNA连接酶;;;;;;;;;;哪些新技术能大大简化基因工程的操作技术?;步骤二:目的基因与运载体重组;;;导入过程:运载体为质粒,受体细胞为细菌;步骤四:目的基因的检测和表达; 不能,受体细胞必须表现出特定的性状,才能说明目的基因完成了表达。;;1.提取目的基因:从小鼠的细胞内提取DNA。同时选择具有选择标记的大肠杆菌质粒,如选择能抗四环素的质粒,并将其提取出来。
2.目的基因与运载体结合:用同一种限制酶分别切割小鼠细胞核中的DNA和质粒DNA,使其产生相同的黏性末端。将切割下的目的基因与切割后的质粒混合,并加入适量的连接酶,获得含有小鼠?-珠蛋白基因的重组质粒。
3.将目的基因导入受体细胞:将含有小鼠?-珠蛋白基因的重组质粒导入到对四环素敏感的大肠杆菌中。
4.对目的基因进行检测:将上述大肠杆菌放到加有四环素的培养基上的培养,能够正常生长的大肠杆菌就含有目的基因,反之则没有。;;;;;;供体细胞中DNA;反转录法:
以目的基因转录成的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA,从而获得所需的基因。;;感谢您的欣赏
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