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高中生物新人教选修三专题细胞工程动物细胞融合与单克隆抗体新人教选修;第2页/共27页;第3页/共27页;第4页/共27页;; 思考:
1、什么叫动物细胞融合?
2、促进细胞融合的方法有哪些 ?
3、细胞融合技术最大的优点是什么?
4、植物体细胞杂交与动物细胞融合
有哪些异同? ;总结:比较植物体细胞杂交和动物细胞融合; 回 顾
1、抗体的化学本质?
2、抗体由什么细胞产生?
3、抗体的作用特点?
4、抗体的分布?;1、抗体的传统生产方法;一个B淋巴细胞——只分泌一种特异性抗体
小鼠骨髓瘤细胞——能无限增殖;2、单克隆抗体的制备过程;1、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合?;2、单克隆抗体的制备过程;杂交细胞;(3)整个制备过程为何要经过两次筛选?;;; ※知识拓展:
如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养?
融合后的细胞经选择性培养基培养后,能存活的细胞就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞,通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释,用多孔细胞培养板培养,使每孔细胞不超过一个,通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体(常用酶联免疫吸附试验法),那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞,挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释,一般需进行3~4次,直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。;单克隆抗体:
特异性强、纯度高、灵敏度高,
产量大、容易标准化生产。;4、单克隆抗体的应用;总结; [例题2]
(1)在用动物细胞融合技术制备单克隆抗体时,
将抗原注射到小鼠体内,可获得(多选) ( )
A.T淋巴细胞 B.效应B淋巴细胞
C.抗体 D.记忆细胞
(2)下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中,
正确的是 (多选) ( )
A.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合,一般需要灭活的仙台
病毒或聚乙二醇诱导
B.融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生单克
隆抗体
C.体外??养时,一个B淋巴细胞可以产生一种抗体,但不
能无限增殖
D.单克隆抗体与常规抗体相比,特异性强,灵敏度高,
优越性明显;已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加聚乙二醇促融,获得杂种细胞。请回答:
(1)试管中除融合的杂种细胞外,还有 种融合细胞。
(2)设计一方法(不考虑机械方法),从培养液中分离出
杂种细胞,并说原理。
方法: 。
原理:;;(二)动物细胞融合;(二)动物细胞融合;感谢观看!
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