发热伴血小板减少综合征概述.pptxVIP

发热伴血小板减少综合征概述;;病毒性出血热;病毒性出血热的病原;;第6页/共70页;第7页/共70页;;鉴定新病毒;;SFTSV一般生物学特性;第12页/共70页;第13页/共70页;;SFTSV感染流行病学特征 ;宿主和媒介 ;SFTSV病毒循环;SFTS临床特征及致病机理 ;;;新型布尼亚病毒的致病机理尚待更多的临床数据和实验室研究进行阐明。选取发热伴血小板减少综合征病不同预后的患者，利用Luminex技术平台，检测了27种细胞因子的动态变化，并通过标准曲线对每种因子进行定量。 ;;;将从患者血清中分离的SFTSV接种到小鼠体内，在感染急性期可引发特征性临床症状，即血小板减少和白细胞减少 发现病毒核酸在血、肝、脾、肾中均可检出 病毒感染可有效地诱导病毒特异性IgM、IgG以及中和抗体的生成 发现SFTSV在肝、脾、肾引起显著病理变化，与临床观察到的肝肾损伤症状一致。;发现脾巨噬细胞为病毒感染复制的靶细胞，在SFTSV感染的脾组织中，巨噬细胞大量增加，血小板也出现大量沉积，并且荧光共定位研究显示病毒与血小板共定位于巨噬细胞的胞浆中。 结合细胞学实验发现SFTSV可以黏附于人血小板并引发巨噬细胞对血小板的吞噬，目前的研究提示SFTSV感染导致的血小板减少可能是由于脾巨噬细胞对病毒黏附血小板的异常清除所致。;;;;样本;常用PCR检测方法;核酸检测流程;1、带手套 2、注意及时更换手套，尽量保持分离RNA的管子封闭。 3、分离RNA保持在冰上 4、使用灭菌和无RNA酶的耗材 5、用0.1M NaOH，1mM EDTA（或氯仿）和无RNA酶水冲洗塑料耗材；玻璃器皿使用含去污剂的水反复冲洗，然后240℃干烤4小时，或充满0.1%DEPC的水37 ℃ 过夜（或不少于孵育12小时）。 6、溶液：如果不能确认是否无RNA酶（RNase-free)，应用0.1%DEPC处理。 7、分离的RNA保存于-20 ℃或以下冰箱，避免反复冻融，可考虑添加额外的RNA酶抑制剂。需要时再分离RNA。;PCR交叉污染的来源与控制;污染的处理 ;SFTSV细胞培养分离与鉴定;3.样品接收和准备 3.1 核对被检患者的姓名、性别、年龄、编号及检测项目；核对被检样本的来源、种类、编号、检测项目等。 3.2 用于检测的待测样品不能及时检测的储存在-70℃。 4.实验原理 标本中病毒通过在敏感组织细??中培养放大，有利于病毒的进一步分析与鉴定，可以用来分离SFTSV的敏感细胞包括：Vero, Vero-E6等。;第37页/共70页;SFTS血清学检测方法;IgM捕捉法ELISA检测SFTSV的IgM抗体;间接法ELISA-IgG抗体;双抗原夹心法ELISA-总抗体;SFTSV双抗体夹心法酶联免疫吸附试验;SFTSV空斑减少中和试验;第44页/共70页;;您 将 会 知 道;;;;;感染性物质的A类包装;感染性物质的A类包装;感染性物质的A类包装;感染性物质的A类包装;A、B类包装的异同点;;;;;;标本包装要求;;;高致病性病原微生物标本运输流程;;;;第68页/共70页;谢 谢;感谢观看！