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实验八透射电子显微镜及扫描电子显微镜的使用第1页/共18页第2页/共18页实验目的与要求掌握透射电子显微镜的成像基本原理及其应用第3页/共18页一、透射电子显微镜的成像基本原理在真空条件下,电子束经高压加速后,穿透样品时形成散射电子和透射电子,它们在电磁透镜的作用下在荧光屏上成像。第4页/共18页第5页/共18页电镜与光镜的比较显微镜分辨本领光源透镜真空成像原理LMTEM200nm100nm0.1nm可见光(400-700) 紫外光(约200nm)电子束(0.01-0.9)玻璃透镜玻璃透镜电磁透镜不要求真空不要求真空要求真空1.33x10-5~1.33x10-3Pa利用样品对光的吸收形成明暗反差和颜色变化利用样品对电子的散射和透射形成明暗反差第6页/共18页主要电镜制样技术? 超薄切片技术 用于电镜观察的样本制备?负染色技术(Negative staining) 染色背景,衬托出样品的精细结构 ?冰冻蚀刻技术(Freeze etching) 冰冻断裂与蚀刻复型:主要用来观察膜断裂面的蛋白质颗粒 和膜表面结构。?电镜三维重构技术 电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的 具有重要应用前景的一门新技术。 电镜三维重构技术与X-射线晶体衍射技术及核磁共振 分析技术相结合,是当前结构生物学(Structural Biology) (主要研究生物大分子空间结构及其相互关系)的主要实验手段。 第7页/共18页超薄切片技术主要包括取材、固定、包埋、切片、染色等步骤。第8页/共18页第9页/共18页二、作业:试比较电子显微镜与普通光学显微镜的异同。第10页/共18页实验八 -2 细胞超微结构观察与扫描电子显微镜的使用第11页/共18页一、实验原理利用二次电子信号成像来观察样品的表面形态。电子“探针”扫描,激发样品表面放出二次电子,探测器收集二次电子成像。第12页/共18页第13页/共18页疟疾破坏的两个红细胞第14页/共18页第15页/共18页第16页/共18页第17页/共18页第18页/共18页感谢您的欣赏
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