NY_T 3870-2021CN 硒蛋白中硒代氨基酸的测定 液相色谱-原子荧光光谱法.docx

ICS 71.040.40 CCS X 41 NY 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 NY/T 3870—2021 硒蛋白中硒代氨基酸的测定 液相色谱原子荧光光谱法 Determination of selenoamino acid in selenoprotein— Liquid chromatography-atomic fluorescence spectrometry 2021-05-07发布2 0 2 1 - 1 1 - 0 1 实 施 2021-05-07发布 中华人民共和国农业农村部发布 I NY/T 3870—2021 前 言 本文件按照GB/T1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本文件起草单位：恩施土家族苗族自治州农业科学院、武汉大学、中硒健康产业投资集团股份有限 公司。 本文件主要起草人：陈永波、刘淑琴、李卫东、黄光昱、张朝阳、胡中立、陈娥、胡百顺、秦邦、刁英、熊倩、 朱云芬、瞿勇、田宗仁、靳素荣。 NY/T 3870—2021 硒蛋白中硒代氨基酸的测定 液相色谱原子荧光光谱法 1 范围 本文件规定了液相色谱-原子荧光光谱法测定硒蛋白中水解硒代氨基酸的方法。 本文件适用于硒蛋白水解后硒代氨基酸[硒代胱氨酸(SeCys)、 甲基-硒代半胱氨酸(MeSeCys) 和 硒 代甲硫氨酸(SeMet) 含量之和]的测定。 本文件适用于植物源硒蛋白和微生物源硒蛋白中硒代氨基酸的测定。 本方法的检出限分别为 SeCys?0.070 mg/kg、MeSeCys 0.032 mg/kg、SeMet 0.14 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中规范性的引用面构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅注该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB1903.28—2018 食品营养强化剂 硒蛋白 GB/T 6682. 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 硒蛋白 selenoprotein 以含硒量较高的可食性植物、微生物为原料，经去脂、水提、乙醇沉淀、干燥等工艺精制而成的富含硒 代氨基酸的食品营养强化剂。 [来源：GB 1903.28—2018] 3.2 硒代氨基酸 selenoamino acid 硒蛋白水解后分解成的含硒氨基酸，包括 SeCys,、MeSeCys 和 SeMct。 4 原理 硒蛋白经盐酸水解后，分解成 SeCys? 、MeSeCys 和 SeMet 等含硒氨基酸，经色谱柱分离后由原子荧 光光谱仪测定。峰面积与溶液中被检测成分含量呈正比，以保留时间定性，外标法定量。 5 试剂或材料 除非另有说明，本文件所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682 规定的一级水。 5.1 试剂 5.1.1 盐酸(HCI): 优级纯。 5.1.2 甲酸(HCOOH)。 5.1.3 氢氧化钾(KOH)。 5.1.4 氢氧化钠(NaOH)。 5.1.5 碘化钾(K1)。 5.1.6 硼氢化钾(KBH;). 5.1.7 磷酸氢二铵[(NH;)。HPO?]。 2 NY/T 3870—2021 5.2 溶液配制 5.2.1 盐酸溶液(6 mol/L): 量取500 mL 盐酸(5.1.1),用水定容至1000 mL。 5.2.2 磷酸氢二铵溶液(40 mmol/L,pH=6.0): 称取5.282 g 磷酸氢二铵(5.1.7)溶于水中，加水至约 950mL, 用甲酸(5.1.2)调节 pH=6.0, 用水定容至1000 mL,0.45μm 滤膜(水相)过滤，超声脱气 2 min～3 min。 5.2.3 2%碘化钾+0.5%氢氧化钾溶液：称取20.0g 碘化钾(5.1.5)、5.0 g 氢氧化钾(5.1.3),用水定容 至1000 mL。 5.2.4 1.5%硼氢化钾+0.5%氢氧化钾溶液：称取15.0g 硼氢化钾(5.1.6)、5.0g 氢氧化钾(5.1.3),用 水定容至1000 mL。 5.2.5 盐酸溶液(10%):量取100mL 盐酸(5.1.1),用水定容至1000mL。 5.2.6 氢氧化钠溶液(6 mol/L): 称取氢氧化钠(5.1.4)24g, 用水定容至100 mL。 5.2.7 氢氧化钠溶液(1 mol/L): 称取氢氧化钠(5.1.4)4 g,