NY_T 3942-2021CN 水果及其制品中L-苹果酸和D-苹果酸的测定 高效液相色谱法.docx

ICS 67.080.10 CCS B 31 NY 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 NY/T 3942-2021 水果及其制品中L- 苹果酸和D- 苹果酸 的测定 高效液相色谱法 Determination of L-malic acid and D-malic acid in fruits and their derived products—High performance liquid chromatography 2021-11-09 发布 2022-05-01 实施 中华人民共和国农业农村部发布 I NY/T 3942—2021 前 言 本文件按照GB/T1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》和 GB/T 20001.4—2015《标准编制规则 第4部分：试验方法标准》的规定起草。 请注意本文件某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由农业农村部种植业管理司提出。 本文件由全国果品标准化技术委员会(SAC/TC 501)归口。 本文件起草单位：中国农业科学院果树研究所、青岛农业大学、青岛市现代农业质量与安全工程重点 实验室、山东农业工程学院。 本文件主要起草人：聂继云、匡立学、沈友明、佟瑶、程杨、徐国锋、李静、闫震、秦旭。 1 NY/T 3942—2021 水果及其制品中 L-苹果酸和 D-苹果酸的测定 高效液相色谱法 1 范围 本文件规定了水果及其制品中L-苹果酸和 D-苹果酸测定的高效液相色谱法。 本文件适用于水果及其制品中L 苹果酸和 D-苹果酸含量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样用水提取，经固相萃取小柱净化，反相液相色谱分离，紫外检测器或二极管阵列检测器检测，以保 留时间定性，峰面积外标法定量。 5 试剂或材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682 规定的一级水。 5.1 乙酸铜[Cu? (CH?COO)?,CAS 号：142712]。 5.2 L-缬氨酸(CsHnNO?,CAS 号：72-18-4)。 5.3 甲醇(CH?O),CAS 号：67-56-1):色谱纯。 5.4 流动相：称取1.5961g 乙酸铜(5.1)至1000 mL 容量瓶中，加水溶解后，加入1.8744gL- 缬氨酸 (5.2),用水溶解并定容，过水相型微孔滤膜(5.10)。 5.5 L-苹果酸 (C?H?O?,CAS 号：97-67-6):纯度为99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准 物质。 5.6 D-苹果酸 (C?H?O:,CAS 号：636-61-3):纯度为99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准 物质。 5.7 标准储备液(2.0 mg/mL): 分别称取I 苹果酸(5.5)和D 苹果酸(5.6)各20 mg (精确至0.1 mg) 于 10mL 容量瓶中，用水溶解并定容，配制成2.0 mg/mL 的标准储备液。4℃下保存，有效期3个月。 5.8 标准工作溶液：分别量取0.05 mL、0.50 mL、1.00 mL、1.50 mL、2.00mL、2.50 mLL 苹果酸和D- 苹果酸的标准储备液(5.7)于6个5 mL 容量瓶中，定容，配制成混合标准溶液。混合标准溶液中 L-苹果 酸和 D 苹果酸的浓度均为0.020 mg/mL、0.20 mg/mL、0.40 mg/mL、0.60 mg/mL、0.80 mg/mL、 1.00 mg/mL。 5.9 净化柱：反相Cis周相萃取小柱，200 mg/6 mL.或性能相当者。 5.10 水相型微孔滤膜：孔径0.45μm。 6 仪器设备 6.1 高效液相色谱仪：配紫外检测器或二极管阵列检测器。 2 NY/T 3942—2021 6.2 电子天平：感量0.01g、0.1 mg。 6.3 匀浆机。 6.4 超声波清洗机：频率不低于40 kHz。 6.5 冷冻研磨仪。 离心机：转速不低于9000 r/min。 6.7 固相萃取装置， 7 试样的制备 7.1 新鲜水果 新鲜水果洗净擦干，取代表性的可食部分约1 kg,切碎，用匀浆机制成匀浆，装入洁净容器，密封， -18 ℃以下冷冻保存。 7.2 果汁