DB64_T 263-2003 马铃薯脱毒种薯繁育技术规程.docx

DB64 宁 夏 回 族 自 治 区 地 方 标 准 DB64/T 263—2003 马铃薯脱毒种薯繁育技术规程 2003-05-12发布 2 0 0 3 - 0 5 - 1 2实 施 宁夏回族自治区质量技术监督局发布 I DB64/T 263—2003 前 言 本标准由宁夏回族自治区农牧厅提出。 本标准由宁夏回族自治区农业技术推广总站起草。 本标准归口宁夏回族自治区农牧厅。 本标准主要起草人：马金虎、田恩平、温 敏、郭志乾、禹学海、王维敬、陈天喜 1 DB64/T 263—2003 马铃薯脱毒种薯繁育技术规程 1 范围 本规程规定了马铃薯脱毒苗、原原种、原种、 一级种和二级种繁育技术。 本规程适用于宁夏回族自治区马铃薯脱毒种薯的繁育生产。可作为宁夏回族自治区各级农业技术推 广、种子部门和有关生产单位繁育马铃薯脱毒种薯而引用。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 DB64/T188—1997 宁夏马铃薯脱毒种薯生产标准 3 定义 3.1 马铃薯病毒 侵染马铃薯造成其退化现象的各种病毒和类病毒，统称马铃薯病毒。 3.1.1 PVX 马铃薯X病毒，也称马铃薯普通花叶病毒，主要症状表现为叶脉间花叶。 3.1.2 PVY 马铃薯Y病毒，也称马铃薯重花叶病毒，主要症状表现为轻花叶或茎粗缩，严重时坏死。 3.1.3 PVS 马铃薯S病毒，也称马铃薯潜隐性花叶病毒，症状表现为叶脉深陷粗缩。 3.1.4 PLRV 马铃薯卷叶病毒，表现症状为叶缘向上卷曲形成管状，病叶小，叶质脆弱，病株呈扫帚状。大多数 品种初侵染时叶尖呈浅黄白色，有些品种呈紫色或红色。 3.1.5 PSTV 马铃薯纺锤形块茎类病毒，症状主要表现在块茎上，病薯呈纺锤形，常发生龟裂畸形，茎叶上症状 表现轻微。 3.2 马铃薯脱毒苗 指对马铃薯块茎进行病毒钝化、催芽处理后，通过茎尖剥离、分生组织培养而脱去PVX、PVY、PVS、 PLRV和PSTV等病毒、类病毒的试管苗及其扩繁苗。 3.3 马铃薯脱毒种薯 利用脱毒苗，在一定的条件下通过世代扩大繁殖，生产出来的达到相应脱毒效果和质量标准的种薯， 包括原原种、原种、 一级种、二级种。 3.3.1 原原种 利用基础脱毒苗切段扦插，在温室或防虫网棚内繁育生产的无病毒种薯。该级脱毒种薯通常繁育生 产为单重1g～20g的微型薯。 3.3.2原种 2 DB64/T 263—2003 用原原种在高山隔离区或具备合格隔离条件的其它地区生产的合格种薯。 3.3.3 一级种 用原种在合格隔离条件下生产的合格种薯。 3.3.4 二级种 用一级种在合格隔离条件下生产的合格种薯。 3.4马铃薯脱毒种薯繁育体系 从培养脱毒苗开始，逐世代扩大繁育生产原原种、原种、 一级种、二级种的梯级繁种体系。 4 脱毒种薯繁育技术 4.1 脱毒苗 4.1.1 块茎钝化和催芽处理 繁育脱毒种薯的马铃薯品种确定后，挑选若干个具有原品种典型特征特性、重100g～150g的壮龄 薯，在2℃~6℃和连续光照下钝化纺锤形块茎类病毒60d, 置于36.5℃~37.5℃温箱中钝化卷叶病毒 30d, 然后在室内13℃~18℃条件下催芽。 4.1.2 茎尖剥离 经过钝化和催芽处理的块茎，待幼芽长至4cm～5cm时，剪取上段2cm进行消毒后，在无菌室内超净 工作台上剥取长0.2mm～0.5mm、带1个～2个叶原基的顶端生长锥 4.1.3 分生组织培养 将剥离的茎尖分生组织立即接种在试管内的附加生长调节剂“MS”培养基上，每只试管接1个茎尖， 接种后用消毒过的棉球或纱布球塞住管口，管口外用牛皮纸包扎、封严，并编号、记录。接种试管置于 气温20℃~25℃、相对湿度70%、光照强度30001ux～5000lux、光照长度16h/d的环境下(光源为日光灯， 辅以散射阳光更佳),对分生组织进行培养。15d后，生长点明显增大变绿；60d后，可长成高约3cm的 小植株。此时，将植株转移到不带有机成分的“MS”培养基上进一步培养，待到长出5片～8片小叶后， 进行病毒检测。 4.1.4 组培苗切段扩繁 对生长到具有7片～8片叶、通过检测不带任何病毒和类病毒的组培苗进行切段扩繁。剪切必须在无 菌条件下操作，剪后每个切段至少带1个叶片。将剪下的切段