病毒感染实验诊断浅谈.pptxVIP

病毒感染实验诊断浅谈;病毒感染的实验诊断;什么是病毒？; 特点： 体积微小，只能在电镜下观察，能通过滤菌器 无完整的细胞结构：蛋白质衣壳＋核酸核心 只有一种类型核酸：RNA或DNA 有严格的细胞内寄生性，只能在活细胞内生长 以核酸复制的方式增殖，不能进行二分裂繁殖 抵抗力特殊：耐冷不耐热，对化学因素的抵抗力较一般比细菌强，耐甘油，对抗生素及磺胺类药物不敏感，干扰素可抑制病毒复制。;病毒感染的实验诊断方法 ;一、标本采集、运送和处理;（二）标本的运送与保存;二、病毒的形态学检查;2. 电镜及免疫电镜检查;三、病毒的分离与鉴定;（一）病毒的分离;1. 组织培养;动物新鲜组织（人胚肾等）→胰酶消化→营养液培养→单层细胞（原代细胞） 原代细胞→胰酶消化→转种培养（次代培养细胞） 对病毒敏感，但制备费时费力，只能传2～3代。;二倍体细胞株 原代细胞反复传代（50～70代）仍保持二倍体染色体特性。病毒分离和疫苗制备的首选细胞株。 传代细胞株 来源于肿瘤细胞或突变的二倍体细胞，能在体外无限增殖。增殖快，不易衰老，易于传代保存。常用于病毒的分离鉴定，但不能用于制备疫苗。;优点 细胞来源广、敏感细胞株多 不受机体免疫因素的影响，个体差异小 病变结果易于观察 可用于病毒的分离鉴定和制备疫苗及抗原 缺点 条件要求相对较高，有细胞培养条件的实验室才能做 ;2. 鸡胚培养;绒毛尿囊膜表现有痘病毒的特异性损伤;优点 鸡胚来源充足，操作简便，有多种接种途径 病毒增殖快，可收获大量病毒 鸡胚本身是无菌的，对接种的病毒不产生抗体 缺点 易感病毒少，目前主要用于流感病毒、腮腺炎病毒、疱疹病毒和痘类病毒的分离培养。 某些病毒在鸡胚内传代后，其毒力下降;3. 动物接种;优点 方法简单、结果易于观察 选择适当的接种途径，可出现类似人类的感染症状，有利于发病机制的研究 缺点 可自然带毒或隐性感染，干扰实验结果 有个体差异 很多病毒无敏感动物，或感染后不出现明显症状;（二）病毒的鉴定;病毒在细胞培养中的表现; ;;;;3. 干扰现象（interference） 当两种不同的病毒同时或先后感染同一细胞时，其中一种病毒可抑制另一种病毒的增殖，称为病毒的干扰现象。 干扰现象也可被相应特异性抗体抑制，称为干扰抑制现象;4. 红细胞吸附及吸附抑制试验;病毒的理化性质测定;病毒的血清学鉴定;四、病毒的血清学诊断;病毒血清学试验常用方法;中和试验的特点： 特异、敏感，既可检测抗体，也可测定抗原（定属、定型）。 既可用细胞培养做，也可用动物或鸡胚接种，以细胞培养法最常用。 检测IgG，不能用于早期诊断，常用于流行病学调查。;（二）补体结合试验;（四）血凝及血凝抑制试验;五、病毒抗原检查;感谢您的欣赏