实验动物细胞融合实验.pptxVIP

实验动物细胞融合实验;实验五 动物细胞融合实验;一、实验目的 了解聚乙二醇（PEG）诱导鸡血细胞融合的基本原理。 通过PEG诱导鸡血细胞之间的融合试验，初 步掌握细胞融合的基本方法。;二、实验原理 细胞融合（cell fusion）指在自然条件下或用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。 人工诱导的细胞融合不仅能进行同种细胞融合，也能进行种间细胞融合。因此，细胞融合技术目前被广泛应用于细胞生物学和医学研究的各个领域，如制备单克隆抗体、研究细胞遗传育种等。 细胞融合的诱导物种类很多，常用的主要有灭活的仙台病毒、聚乙二醇和电脉冲。;聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)是乙二醇的多聚化合物，相对分子质量在200-6000均可用作细胞融合剂。 PEG 可借氢键与水分子结合，在高浓度(50％)的 PEG 溶液中自由水消失，导致细胞脱水而发生质膜结构的变化， 进而使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，从而使细胞发生融合。 选择合适的分子量、浓度及作用时间是 PEG 融合技术的关键。;三、实验用品： 试剂: Alsever 溶液、 0.85％生理盐水、GKN 溶液、 吉姆萨染液、 50％PEG（WM=4000）溶液、Hank’s原液（10×） 材料: 鸡红细胞悬液（课前制备） 器材：血球计数板、滴管、离心管、烧杯、注射器、凹玻片、盖玻片。 设备