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CellSearch技术原理和系统简介第1页/共45页 主要内容CellSearch技术原理CellSearch系统简介CellSearch循环肿瘤细胞试剂盒介绍CellSearch系统临床应用CellSearch送样指南第2页/共45页 主要内容CellSearch技术原理CellSearch系统简介CellSearch循环肿瘤细胞试剂盒介绍CellSearch系统临床应用CellSearch送样指南第3页/共45页 肿瘤生理学身体由4类基本组织构成:- 上皮组织 - 结缔组织 - 肌肉组织 - 神经组织 上皮细胞覆盖身体表面、体腔和腺体肿瘤可能在任何组织上发生然而，在45岁之前，超过90%的肿瘤均源于上皮细胞第4页/共45页 循环肿瘤细胞CTC肿瘤乳腺癌前列腺癌结肠癌肺癌卵巢癌胰腺癌头颈部癌 CTC指自发或因诊疗操作进入外周血循环的肿瘤细胞 进入循环的肿瘤细胞绝大多数在短期内死亡。只有极少数具有高度活力、高度转移潜能的肿瘤细胞在循环系统中存活下来，相互聚集形成微小癌栓，并在一定条件下发展为转移灶。因此，在外周血中检测到肿瘤细胞预示着有可能发生肿瘤转移。证实的临床应用价值无进展生存期总体生存率治疗监测潜在的临床应用价值分期诊断第5页/共45页 过去CTC用于临床的障碍结果缺乏一致性方法差异样本保存不良样本规模样本类型研究设计随访时间由于在循环肿瘤细胞分离的实验室方法上存在不一致和差异，因此需要实现: 自动化标准化第6页/共45页 CellSearch系统CellSearch 是计数分析循环肿瘤细胞（CTC）的全新产品由强生公司麾下的Veridex公司开发全球第一个也是唯一经过FDA批准用于恶性肿瘤管理的检测血液中循环肿瘤细胞（CTC）的商业化产品美国克里夫兰医学中心Cleveland Clinic “2009年十大医学创新技术”第一名（Top Ten Medical Innovation)Prix Galien委员会2009年“最佳医学技术奖”（Best Medical Technology）第7页/共45页 为什么选择CellSearch系统为什么要选择使用CellSearch系统?唯一的标准化，自动化循环肿瘤细胞计数系统CellSearch系统已经被证明可以预测无进展生存期和总生存期 临床应用转移性癌症的监护无进展生存期总生存期未来: 疾病管理第8页/共45页 CellSearch技术基本原理利用免疫纳米磁颗粒富集上皮来源的细胞纳米磁颗粒包含一个纳米铁磁核心，外面包被了抗EpCAM（上皮细胞粘附因子）的特异性抗体通过抗原抗体反应，纳米磁颗粒会与血液中的所有表达EpCAM的细胞结合结合荧光染料的抗－CD45和抗－细胞角蛋白（CK）8，18/19与细胞核DAPI荧光染色试剂共同识别CTC不同的试剂盒会使用不同的荧光染料第9页/共45页 循环系统细胞分析过程第10页/共45页 抗EpCAM纳米磁颗粒与上皮细胞结合示意图 CellSearch专利的捕获增强剂可以促进纳米磁颗粒与上皮细胞更好的结合抗EpCAM纳米磁颗粒示意图CTC细胞抗EpCAM纳米磁颗粒第11页/共45页 CTC免疫荧光染色示意图CTC + HER-2YCD45抗－CD45-异藻蓝蛋白 CTC的免疫荧光染色特性： EpCAM＋ CK＋ DAPI＋ CD45－ 白细胞的免疫荧光染色特性： EpCAM－ CK－ DAPI＋ CD45＋第12页/共45页 CellSearch自动样本处理过程第13页/共45页 自动化获取结果系统自动将被捕获的、经过染色的细胞置入MagNest装置的样本盒中由于MagNest的磁场作用，捕获的靶细胞将移动至样本盒的分析表面，形成单细胞层系统自动分析后得到结果并由操作人员进行最终判读第14页/共45页 主要内容CellSearch技术原理CellSearch系统简介CellSearch循环肿瘤细胞试剂盒介绍CellSearch系统临床应用CellSearch送样指南第15页/共45页 CellSearch系统概览第16页/共45页 CellSave储存管含有EDTA和专利的细胞防腐剂保护循环肿瘤细胞(CTC)的形态和抗原表达样本在室温（15－30℃）条件下储存的稳定时间可达96小时，便于运输第17页/共45页 CellTracks? AutoPrep?系统 1完全自动化的样本制备装置，用于对循环肿瘤细胞进行捕获和染色可对8个样本进行批处理，允许完全无人值守运行通过完整的过程控制，可对循环肿瘤细胞样本进行标准化的分析前制备第18页/共45页 机器尺寸: 173cm x 68cm x 68cm重量: 136kg要求保持电压恒定 提供了UPS电源装置需要的仪器流体仪器缓冲液去离子水次氯酸钠，浓度为