第二节蛋白质的生物合成修饰和分泌.pptVIP

多肽类激素均以“前原”形式合成，含有的信号序列（前）和附加序列（原）在成熟过程中被切除掉。通常单一前体顺序可能包含两个或者多个不同激素，通过累加切割释放出每个激素 多肽类激素的水解产生 当前第63页\共有130页\编于星期五\22点 蛋白质剪接 原核生物 和低等真核生物的一些基因含有一个在阅读框内的编码一个内在域的可读框，该内在域随后从蛋白质上切下来，形成新的蛋白质，称为内蛋白子（intein）。 当前第64页\共有130页\编于星期五\22点 2.二硫键的形成 二硫键通常只发现于分泌蛋白（如胰岛素）和某些膜蛋白中，在细胞质中由于有各种还原性物质（如谷胱甘肽glutathione和硫氧还蛋白thioredoxin）所以细胞质蛋白没有二硫键。因为内质网腔是一个非还原性环境，所以粗糙内质网上的新生肽只暂时形成二硫键。当新生肽进入内质网腔时，一些肽链可能会按氨基酸次序依次暂时形成二硫键，但最终会通过交换二硫键位置的形式形成正确的结构，内质网中可能还有一种二硫键异构酶（disulfide isomerase）催化该过程。二硫键的形成对蛋白质的功能活性具有重要意义。 当前第65页\共有130页\编于星期五\22点 3.糖基化 糖基化是蛋白质的一种重要的翻译后修饰。蛋白质的糖基化是低聚糖以糖苷的形式与蛋白上特定的氨基酸残基共价结合的过程。 蛋白质糖基化可以按照氨基酸和糖的连接方式分为四类： O位糖基化、N位糖基化、C位甘露糖化以及糖基磷脂酰肌醇GPI (glycophosphatidlyinositol)锚定连接。 当前第66页\共有130页\编于星期五\22点 O位糖基化多发生在临近脯氨酸的丝氨酸或苏氨酸残基上。O位多聚糖以逐步加接单糖的形式形成低聚糖。目前没有发现特异的蛋白序列作为糖基化位点。 O位糖基化反应发生在细胞内两个部位，一是发生在高尔基体上，一是发生在细胞核或细胞质中。 发生在高尔基体上的糖基化, 起始于丝氨酸和苏氨酸羟基上连接N-乙酰半乳糖胺、N-乙酰葡萄糖胺、甘露糖、海藻糖等的还原端。分泌蛋白和膜结合蛋白O位糖基化发生在N位糖基化及蛋白折叠之后，在高尔基体顺面上完成。 发生在细胞核和细胞质中的糖基化是在丝氨酸或苏氨酸残基上连接一个单糖：N-乙酰葡萄糖胺。 当前第67页\共有130页\编于星期五\22点 N位糖基化是在内质网上由糖基转移酶催化，在内分泌蛋白和膜结合蛋白的天冬酰氨残基的氨基上结合寡糖的过程。普遍认为N位糖基化发生在蛋白Asn-Xaa-Ser/Thr(Xaa为除脯氨酸外的所有氨基酸残基)序列上，少数情况下Asn-Xaa-Cys 序列也作为糖基化位点。 C位甘露糖化是将一分子α-mannopyranosyl 残基通过C—C键连接到色氨酸吲哚环C-2上，这种糖基化方式多发生在模体W-X-X-W，W-X-X-C 或者W-X-X-F的第一个色氨酸残基上。 GPI锚定连接指的是磷脂酰-纤维糖组在靠近蛋白C端部位结合，将蛋白连接到细胞膜上。 当前第68页\共有130页\编于星期五\22点 蛋白糖基化修饰的功能 （1）糖基化影响蛋白质分子的生物活性 对于某些蛋白质分子如人绒毛膜促性腺激素(hCG)而言，糖基化是其发挥生物学活性必需的。改变蛋白质的糖基化还可以使蛋白分子产生新的生物学活性。 （2）糖基化增加蛋白质的稳定性 糖基化可增加蛋白质对于各种变性条件(如变性剂、热等) 的稳定性，防止蛋白质的相互聚集。同时，蛋白质表面的糖链还可覆盖蛋白质分子中的某些蛋白酶降解位点，从而增加蛋白质对于蛋白酶的抗性。 当前第69页\共有130页\编于星期五\22点 （3）糖基化与蛋白质的免疫原性 一方面，蛋白质表面的糖链可诱发特定的免疫反应，另一方面，糖链又可遮盖蛋白质表面的某些抗原表位从而降低其免疫原性。 （4）糖基化与分子识别 细胞表面的糖链被认为是“分子天线”参与细胞识别，糖链还参与抗原与抗体及抗体Fc段与其受体FcR的相互识别。 当前第70页\共有130页\编于星期五\22点 （5）糖基化与蛋白质的可溶性 蛋白质表面的糖链可增加蛋白质分子的溶解性。 （6）糖基化影响蛋白质的转运 蛋白质表面的糖链可作为蛋白分子的胞内定位信号，如糖蛋白N2糖链经修饰，带有甘露糖，这些糖蛋白(多数是水解酶)就被分拣和投递到溶酶体中。糖基化还可增加糖蛋白的分泌效率。 （7）糖基化影响治疗用蛋白的疗效 对于治疗用蛋白，糖基化还可影响蛋白药物在体内的半衰期和靶向性。 当前第71页\共有130页\编于星期五\22点 4. 脂基化修饰 蛋白质脂基化为长脂肪链通过O或者S原子与蛋白质缀合得到蛋白缀合物的过程，通常是蛋白质分子中半胱氨酸残基的S键被棕榈酰基乙酰化，或者被法呢基烷基化。这两种脂肪链通常共同修饰同一个蛋白质分子，通过脂肪链