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实验三细胞化学成分显示第1页/共14页 实验三 细胞化学成分的显示 第2页/共14页 ㈠掌握血涂片及骨髓涂片制作方法。㈡掌握碱性蛋白、过氧化物酶及核酸显示的原理。㈢熟悉上述化学成分在细胞中的分布。㈣了解上述化学成分显示的方法。一、目的要求第3页/共14页 二、实验内容和实验方法 细胞内碱性蛋白的显示 DNA和RNA的显示 过氧化氢酶的显示 第4页/共14页 细胞内碱性蛋白的显示 ㈠实验原理 标本经三氯醋酸处理抽提掉核酸后，用不同pH值的快绿染液分别染色，使细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白质显示出来。第5页/共14页 ㈡实验方法 1. 临时装片的制备。 2. 固定：70%乙醇，10min。 3. 70℃～90℃ ，5%三氯醋酸，15分。 4. 清水冲洗。 5. 染色：碱性固绿染色5min。 6. 清水冲洗。 7. 晾干，镜检。第6页/共14页 第7页/共14页 DNA和RNA的显示 ㈠实验原理 利用碱性染料甲基绿和派洛宁处理细胞，可使其中的DNA和RNA呈现出不同的颜色，这种颜色上的差异是由DNA和RNA聚合程度的不同所引起。 第8页/共14页 ㈡ 实验方法－蟾蜍血涂片DNA和RNA的显示 1. 制备蟾蜍血涂片：同上。 2. 固定：70%乙醇，5min，晾干。 3. 染色：甲基绿—派洛宁，10min。 4. 清水冲洗。 5. 分化：纯丙酮。 6. 镜检。第9页/共14页 第10页/共14页 1. 临时装片的制备。2.固定：70%乙醇，10min。3. 70℃～90℃ ，5%三氯醋酸，15分。4. 清水冲洗。5. 染色：碱性固绿染色5min。6. 清水冲洗。 7. 风干，镜检。1. 制备蟾蜍血涂片：同上。2. 固定：70%乙醇，5min，晾干。 3. 染色：甲基绿—派洛宁，10min。 4. 清水冲洗。5. 分化：纯丙酮。6. 镜检。碱性蛋白 DNA和RNA第11页/共14页 过氧化氢酶的显示 ㈠实验原理 过氧化氢酶系能把许多胺类物质氧化为有色化合物，若用联苯胺混合液处理标本，细胞内的过氧化氢酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝，进而变为棕色的联苯胺腙。第12页/共14页 ㈡实验方法－家兔骨髓细胞中过氧化氢酶的显示取材。 2. 固定：0.5%硫酸铜，30s～1分钟。3. 氧化： 联苯胺，3～6分钟。 4. 清水冲洗。5. 染色： 1%番红，1～2min。6. 清水冲洗。 7. 晾干镜检。第13页/共14页 感谢您的欣赏第14页/共14页