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常用鉴定试剂的配制和应用 常用鉴定试剂的配制和应用 一、通用试剂 一、通用试剂 1、碘试剂 1、碘试剂 检查一般有机化合物。 碘蒸气 预先将盛有碘结晶的小杯置于密闭的玻璃容器内，使容器空间被碘蒸气饱和，将薄层置于容器内数分钟即显棕色斑点。有时，于容器中加放一小杯水，增加容器内的湿度，可提高显色的灵敏度。 （2）0.5％碘的氯仿溶液 喷洒试剂，置空气中待过量的碘挥发后，喷 1％淀粉溶液，斑点由棕色转为蓝色。 2、硫酸试剂 2、硫酸试剂 检查一般有机化合物。 5％硫酸乙醇溶液作为色谱显色剂用。喷洒后，置空气中干燥15min，100℃烤至斑点呈色（不同化合物呈不同颜色）。 3 3、重铬酸钾-硫酸试剂 检查一般有机化合物。 5g 重铬酸钾溶于 l00ml40％硫酸中。喷该试剂后，150℃加热至斑点出现(不同化合物呈不同颜色)。 4、磷钼酸试剂 4、磷钼酸试剂 检查还原性成分。 5％磷钼酸乙醇溶液。喷洒后，120℃加热至呈蓝色斑点。 5、磷钨酸试剂 5、磷钨酸试剂 检查还原性成分 20％磷钨酸乙醇溶液。喷洒后，120℃烘烤，还原性物质呈蓝色斑点。 6、硝酸银-氢氧化铵试剂 6、硝酸银-氢氧化铵试剂 检查还原性成分。 溶液 I：0.1mol／L 硝酸银溶液。溶液Ⅱ：10％氢氧化铵溶液。临用前溶液I和Ⅱ 以 7、中性高锰酸钾试剂1︰5 混合。喷洒后 105℃加热 5~l0min，至深黑色斑点出现。 7、中性高锰酸钾试剂 检查易还原性成分。 0.05％高锰酸钾溶液。喷洒后粉红色背景上显黄色斑点。 8、碱性高锰酸钾试剂 8、碱性高锰酸钾试剂 检查还原性成分。 溶液 I：1％高锰酸钾溶液。溶液Ⅱ：5％碳酸钠溶液。溶液 I和Ⅱ等量混合使用， 9、四唑蓝试剂喷洒后，粉红背景上显黄色斑点。 9、四唑蓝试剂 检查还原性成分。 溶液 I：0．5％四唑蓝甲醇溶液。溶液Ⅱ：25％氢氧化钠溶液。临用前两液等量混合。喷洒后，微热或室温放置显紫色斑点。 10 10、荧光素-溴试剂 检查不饱和化合物。 溶液 I：0.1g荧光素溶于 l00ml乙醇中。溶液Ⅱ：5g 溴溶于 l00ml四氯化碳中。先喷洒溶液 I，然后将薄层板放入盛有溶液Ⅱ的缸内，黄色斑点出现后，于紫外光灯下检视，红色底板上显黄色荧光斑点。 11．荧光显色试剂 11．荧光显色试剂 检查一般有机化合物。 （1）0.2％2，7--氯 荧光素乙醇溶液。 （2）0.01％荧光素乙醇溶液。 （3）0.1％桑色素乙醇溶液。 （4）0.05％罗丹明 B 乙醇溶液。 二、苷类鉴定试剂喷洒任一溶液，不同的化合物在荧光背景上可显黑色或其它荧光斑点。 二、苷类鉴定试剂 1、糖鉴定试剂 1、糖鉴定试剂 （1） 1-萘酚-硫酸试剂检查还原糖。 ①溶液 I：10％ 1-萘酚乙醇溶液。溶液Ⅱ：硫酸。取lml 样品的稀乙醇溶液或水溶液，加入溶液I 2～3 滴，混匀，沿试管壁缓缓加入少量溶液Ⅱ，二液面交界处产生紫红色环为阳性反应。 ②15％ 1-萘酚乙醇溶液 21m1 、硫酸 13ml、乙醇 87ml 及水 8ml 混匀后使用。喷洒于薄层板上，100℃烤 3～6min，多数糖显蓝色，鼠李糖显橙色，所显颜色于室温可稳定 2 天～3 天。 斐林试剂 检查还原糖。 ‘ 溶液 I：6.93g结晶硫酸铜溶于 l00ml 水中。溶液Ⅱ：34.6g酒石酸钾钠、10g 氢氧化钠溶于 l00ml 水中。取 lml 样品热水提取液，加入 4～5 滴用时配制的溶液Ⅰ、Ⅱ等量混合液，在沸水浴中加热数分钟，产生砖红色沉淀为阳性反应。如检查多糖和甙，取 lml样品水提液，加入 lmll0％盐酸溶液，在沸水浴上加热 l0min， 过滤，再用 10％氢氧化钠溶液调至中性，按上述方法检查还原糖。 氨性硝酸银试剂 检查还原糖。 硝酸银 1g，加水 20ml 溶解，小心滴加适量氨水，边加边搅拌，至开始产生的沉淀将近全部溶解为止，过滤。取 lml样品的水溶液，加入 lml试剂，混匀后，40℃ 微热数分钟，管壁析出银镜或产生黑色沉淀为阳性反应。本试剂也可作为色谱显色剂，喷洒后于 110℃加热数分钟，显棕黑色斑点为阳性反应。还原性物质如醛类、邻二酚类等有干扰。 茴香醛-硫酸试剂检查糖类化合物。 硫酸 lml 加到含茴香醛 0.5ml 的乙酸溶液 50ml 中，需临用前配制。喷洒于薄层板上，105℃加热至显示色斑，不同糖显不同颜色。 苯胺-邻苯二甲酸试剂检查糖类化合物。 苯胺 0.93g和邻苯二甲酸