实验六细胞染色体的制备.pptxVIP

实验六细胞染色体的制备;2008级生工何佳霖小组;2011级生工1班罗甜甜小组;华俊豪小组2011级生工1班;实验六细胞染色体制备与观察 ;一、目的与要求;二、材料、试剂与器材;3、器材： 显微镜，载玻片，盖玻片，镊子，滴管，擦镜纸，刀片，恒温水浴锅 ，离心机,离心管, 小培养皿4套，剪刀和电脑等;第9页/共28页;问 题 1、什么叫染色体？ ; 由脱氧核糖核酸、蛋白质和少量核糖核酸组成的线状或棒状物，是生物主要遗传物质的载体。是细胞中可被碱性染料着色的物质。;第12页/共28页;第13页/共28页;染色体模式图;第15页/共28页;2、依据着丝粒在染色体上所处的位置划分哪四类？ 1）中间着丝粒染色体（M） 2）近中间着丝粒染色体（SM） 3）近端着丝粒染色体（ST） 4）端着丝粒染色体（T） 只有一条臂。 ;中期染色体分类的形态图;三、实验操作;1）、实验原理;2）、实验步骤 （1）、在实验前4-8小时，取20g左右的小白鼠，以4μg/ g体重的剂量从腹腔注射秋水仙素； ;（2)、 取材： 利用断颈法处死小白鼠，置于解剖盘内，剪开后肢皮肤和肌肉，取出动物后肢的胫骨与股骨,剔除肌肉、肌腱，将其置于小培养皿中，用生理盐水洗净，剪去长骨两端；;（3)、取1.5ml 2%柠檬酸钠用注射器注入骨髓腔中将骨髓细胞冲洗出来，然后吹打散。转入10ml离心管中。 （4)、在离心管中加8ml 0.4%KCl液，吹打散.将离心管置于37℃水浴锅内处理20min （5)、离心：1500转/min，离心10min （6)、弃去上清液，沿着管壁缓慢加入固定液5ml。 （7)、用吸管轻轻吹打细胞，静止固定20min，离心，弃去上清液。重复上述再固定1次。 ;（8)、离心完毕，弃去固定液，依据管中细胞的量加入少量的固定液将细胞块吹打均匀，制备成细胞悬液。 （9)、在干净、湿、冷的载玻片上滴一滴细胞悬液，在酒精灯上文火烘干或晾干。 （10)、染色：在载玻片的细胞悬液上滴一滴 1：10 Giemsa磷酸盐缓冲液，染色5min。 （11)、冲洗与观察 ;2、植物细胞染色体标本制备;2）实验步骤;(3) 固定：用水洗净处理过的根尖，经Carnoy固定液中固定2-4h，转入70％乙醇中，4℃保存备用。 (4) 解离：取出根尖，用蒸馏水洗净，放入10% HCl中60℃解离 15min，再用蒸馏水洗净。 (5) 染色：苯酚品红或亚甲基蓝 染色5min。 (6) 压片：把根尖放在载玻片上，加一滴45 %醋酸，盖上盖玻片，垂直轻压，使细胞和染色体分散。 （7）镜检;3、实验报告 要求：1、观察小白鼠骨髓细胞染色体的形态， 并绘制染色体图 2、对小白鼠细胞染色体和洋葱根尖细胞 或玉米根尖细胞染色体计数 ;感谢您的欣赏