实验二醋酸纤维树脂.pptVIP

第一页，共十三页，2022年，8月28日 [实验目的] 学习醋酸纤维薄膜电泳的基本原理和操作方法。 掌握电泳鉴定血清白蛋白的方法。 第二页，共十三页，2022年，8月28日 [实验原理] 电泳 —— 带电质点(分子、离子、胶体颗粒)在电场作用下向带相反电荷的电极移动的现象。除了电荷情况外，带电质点的重量、形状等也对它的移动产生一定的影响。 各种蛋白质分子在不同的pH 条件下的带电情况不同，这取决于蛋白质的等电点pI值—— pI＞pH 时，蛋白质带正电荷；pI＜pH时，蛋白质带负电荷。在这次实验的pH条件(8.6)下，样品蛋白质带负电荷———在电场中向阳极移动。 醋酸纤维薄膜电泳是以醋酸纤维薄膜作为支持物的电泳方法。醋酸纤维薄膜由二乙酸纤维素制成，具有均一泡沫样结构，有强渗透性，对分子移动无阻力。作为区带电泳的支持物进行蛋白电泳有简便、快速，样品用量少等优点。 第三页，共十三页，2022年，8月28日 实验以醋酸纤维素为电泳支持物，分离血清蛋白。 血清中含有清蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白和各种脂蛋白等。各种蛋白质由于氨基酸组分、立体构象、分子量、等电点及形状不同，在电场中迁移速度不同。分子量小、等电点低，在相同碱性pH缓冲体系中，带负电荷多的蛋白质颗粒在电场中迁移速度快。 如以醋酸纤维薄膜为支持物，正常人血清在pH8.6的缓冲体系中电泳1 h左右，染色后可显示