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相位差显微镜 位相差显微镜相差显微镜是能将光通过物体时产生的相位差（或光程差）转变为振幅（光强度）变化的显微镜。人的眼睛只能鉴别可见光的波长（颜色）和振幅的变化，不能鉴别相位的变化。但是大多数生物标本高度透明，光波通过后振幅基本不变，却存在相位的变化，人的眼睛感觉不到。19世纪30年代德国物理学家泽尼克首先设计并于1942年制造了第一台相差显微镜，能将这种看不见的相位变化转变为看得见的振幅变化，由于此项发明，泽尼克于1953年获诺贝尔奖。相差显微镜主要用于观察活细胞，不染色的组织切片或缺少反差的染色标本。 第三十页，共五十五页，2022年，8月28日 解剖显微镜 此种显微镜放大倍率为4X至40X或更高，其倍率虽然不高，但是可以观察不透明的物体，因为光线是物体表面反射入镜，与复式显微镜不同，使用时用两眼观察，可观察到立体物像，且可边观察边解剖。 第三十一页，共五十五页，2022年，8月28日 扫描式电子显微镜SEM 透射式电子显微镜 1、透射式电子显微镜1932年，德国科学家用电子替代可见光制成，其解像力是人眼的10000倍，放大倍率达250000倍或更多。使用穿透式电子显微镜的标本需要非常薄，(7.5-15nm)。 2、扫描式电子显微镜扫描式电子显微镜的电子束不穿过标本，所以标本无需切片处理，而代之在标本表面涂上一层铂金，当电子撞击标本表面各点时，便产生次及电子，呈现立体状态，可观察标本的形状及表面的特征。 第三十二页，共五十五页，2022年，8月28日 显微镜基本构造 第三十三页，共五十五页，2022年，8月28日 普通光学显微镜的构造可分为两大部分：一为机械装置，一为光学系统。 机械装置  显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件 （1）镜座 ? 镜座是显微镜的基本支架，它由底座和镜臂两部分组成。在它上面连接有载物台和镜筒，它是用来安装光学放大系 统部件的基础。 （2）镜筒 ? 镜筒上接接目镜，下接转换器，形成接目镜与物镜（装在转换器下）间的暗室。 第三十四页，共五十五页，2022年，8月28日 （3）物镜转换器 ? 物镜转换器上可安装3—4个接物镜，一般是三个接物镜（低倍、高倍、油镜）。转动转换器，可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通，与镜筒上面的接目镜构成一个放大系统。 （4）载物台? 载物台中央有一孔，为光线通路。在台上装有弹簧标本夹和推动器，其作用为固定或移动标本的位置，使得镜检对象恰好位于视野中心。 （5）推动器? 是移动标本的机械装置，它是由一横一纵两个推进齿轴的金属架构成的，在纵横架杆上刻有刻度标尺。 第三十五页，共五十五页，2022年，8月28日 （6）粗动螺旋 ? 是移动镜筒调节物镜和标本间距离的机件 （7）微动螺旋? 用粗动螺旋只可以粗放的调节焦距，要得到最清晰的物象，需要用微动螺旋做进一步调节。微动螺旋每转一圈镜筒移动0.1毫米。 光学系统  由反光镜、聚光器、物镜、目镜等组成，光学系统使物体放大，形成物体放大像 。  第三十六页，共五十五页，2022年，8月28日 显微镜基本操作 a、? 观察前的准备 （1）显微镜的搬运 显微镜从显微镜柜或镜箱内拿出时，要用右手紧握镜臂，左手托住镜座，平稳地将显微镜搬运到实验桌上。 （2）显微镜的放置 将显微镜放在自己身体的左前方，离桌子边缘约10cm左右，右侧可放记录本或绘图纸。 （3）调节光的强度 接通电源，可利用灯光通过反光镜来调节光强度。 b、观察? （1）低倍镜观察? 将标本片放置在载物台上，用标本夹夹住，移动推动器，使被观察的标本处在物镜正下方，转动粗调节旋钮，使物镜调至接近标本处，用调节旋钮慢慢下降载物台，直至物像出现直到物像清晰为止。用推动器移动标本片，找到合适的目的像并将它移到视野中央进行观察。 第三十七页，共五十五页，2022年，8月28日 （2）高倍镜观察? 在低倍物镜观察的基础上转换高倍物镜。 （3）油镜观察? 先用粗调节旋钮将载物台下降，并将高倍镜转出；在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油；用调节旋钮将载物台缓缓地上升，使油镜浸入香柏油中；用调节旋钮调至最清晰为止；观察完毕，下降载物台，将油镜头转出，先用擦镜纸擦去镜头上的油。 3、显微镜的保养 （1）观察完后，移去观察的载玻片标本。 （2）用过油浸镜的，先用擦镜纸将镜头上的油擦去，再用擦镜纸蘸着二甲苯擦拭2—3次，再用擦镜纸将二甲苯擦去。 （3）转动物镜转换器，将目镜呈现八字放置与载物台错开。