实验细胞的活体染色.pptxVIP

实验细胞的活体染色 第1页/共11页 细胞生物学实验  第2页/共11页 实验2 细胞活体染色 目的要求 观察活细胞内线粒体的形态、数量与分布。 掌握细胞活体染色技术及观察方法。 第3页/共11页 实验原理 活体染色是指对细胞或组织在活体状态下进行的一种无毒害的染色方法，可以显示出活细胞内的某种天然结构存在的真实性，不影响细胞的生命活动和产生任何物理、化学变化。 一般的生物材料不能穿透细胞膜，只有当细胞被固定后，细胞膜被破坏，染料才能进入细胞内部。但是，有一些染料（称“活体染料”）却能进入活细胞，它们是一些无毒或毒性很小的染色剂，能使细胞中某些特定结构着色。活体染料基本上不影响或很少影响细胞的生命活动。 第4页/共11页 实验原理 活体染色的机制是染料的堆集。利用染料的“电化学”特性起作用。由于染料(碱性染料)的胶粒表面带有阳离子，酸性染料的胶粒表面带阴离子，而被染部分本身具有阴离子或阳离子，这样，它们彼此之间发生吸引作用，染料就被堆集下来。 活体染料多为碱性染料,如中性红、詹纳斯绿B、次甲基蓝、甲苯胶蓝、亮焦油紫等。活体染料一般具有专一性，例如，中性红染液泡，詹纳斯绿染线粒体。如中性红为弱碱性染料，对液泡 (高尔基体)的染色有专一性，只将活细胞中的液泡系染成红色，细胞核与细胞质完全不着色，这可能与液泡中某些蛋白质有关。詹纳斯绿Ｂ可专一性地对对线粒体进行活染,这是由于线粒体内