基因组编辑技术.pptxVIP

第1页/共41页基因组编辑技术第2页/共41页基因编辑的定义： 通过精确识别靶细胞DNA片段中靶点的核苷酸序列，利用核酸内切酶对DNA靶点序列进行切割，从而完成对靶细胞DNA目的基因片段的精确编辑。 第3页/共41页基因编辑的优势与传统的以同源重组和胚胎干细胞(embryonic stem cell，ES)技术为基础的基因打靶技术相比，基因编辑新技术保留了可定点修饰的特点，可应用到更多的物种上，效率更高，构建时间更短，成本更低。第4页/共41页基因编辑原理现代基因组编辑技术的基本原理是相同的，即借助特异性 DNA 双链断裂( DNA double-strand breaks DSBs) 激活细胞天然的修复机制，包括非同源末端连接( NHEJ)和同源重组修复(HDR) 两条途径。第5页/共41页基因编辑发展史 第一代: ZFN(锌指核酸酶) 第二代: TALEN(转录激活样效应因子核酸酶)第三代: CRISPR/Cas9(成簇的规律性间隔的短回文重复序列)第四代：NgAgo - gDNA 韩春雨第6页/共41页 ZFN 基因组编辑技术 ZFN 技术是第一代基因组编辑技术，其功能的实现是基于具有独特的DNA序列识别的锌指蛋白发展起来的。 1986年Diakun 等首先在真核生物转录因子家族的 DNA 结合区域发现了Cys2- His2锌指模块。 1996年，Kim等首次人工连接了锌指蛋