基因突变与交换课件.pptVIP

Bagg et al. P.N.A.S. 78:5751, 1981 with a UV of 10 J/m2. measured the β-galactosidase activity cells with the lac genes under control of the umuDC promoter umuDC promoter is UV-inducible with a UV RecA-P; 三种功能 ● DNA 重组活性 ● 与S.S. DNA结合活性 ● 少数蛋白的proteinase活性 当DNA正常复制时 （无复制受阻，无DNA损伤， 无TT dimer） RecA-p不表现proteinase活性 当DNA复制受阻/ DNA damaged 能量大量消耗 细胞内原少量表达的RecA-p 与S.S, DNA结合 激活RecA-p的proteinase活性 修复损伤 LexA-p降解 RecA-p高效表达 300 times up SOS open 当DNA复制度过难关后 SOS repair 是一种error-prone 极强的修复机制 是进化中形成的“ 竭尽全力，治病救人” 的措施 （正常状态下，SOS是关闭的） RecA-p很快消失 LexA gene on SOS off 7.3.2.5. 突变的形成 DNA 未经修复 经过修复 / 校正 死亡 突变率降低 倾向差错修复(间接） (重组修复，SOS） 避免差错修复（直接） (光修复，切补修复) 形成突变 不形成突变 DNA damaged / mispairing 物理诱变，化学诱变，自发突变 突变是在修复过程中形成的（非准确的修复） 7.3.3. 基因的回复突变 （back mutation / reverse mutation） 7.3.3.1. 回复突变的概念 wild type mutant (in phenotype) mutation (low F.) back mutation (very low F.) 7.3.3.2. 回复突变的分子机制 a) AGC (Ser) ? ACC (Thr) ? AGC (Ser) b) AGC (Ser) ? AGG (Arg) ? AGT (Ser) c) AGC (Ser) ? AGG (Arg) ? AAG (Lys) if Ser ≈ Lys d) Intragenic suppression (第二位点突变引起的基因内校正/密码子间两次错义突变的互补) e.g. trp.A ---UGG174----------GGA210---(w.t.) (lys) (Gly) back mutation (Cys) （Gly） ----UGG 174-----------GGA210---- ----UGG174----------GGA210---- ----UGC174-----------GAA210---- 活性结构 无活性结构 C A 无活性结构 (Lys) (Glu) 如何采用简单的遗传学方法区别 dNt的回复突变与intragenic mutation?! 这种回复突变有时表现为高温敏感型?! Intergenic suppression—2 （Su＋） Nonsense suppressor Missense suppressor Intergenic suppression—2 AGAUCU Gly Arg Gly UCU UCU GGACCU Gly Gly Intergenic suppresion-3 (多聚体酶类构型的吻合) Subunit-1 Subunit-2 + Active form A B B + Inactive form Back mut a b Active form 7.4. 基因重组交换的 分子机制 7.4.1. 自然界的DNA分子均是重组体 (recombinant) 变异是生物进化的重要因素之一 生物对环境的适应机制 自然选择的重要基础 可遗传的变异； 突变 （点突变，染色体变异） 频率低，突变修复 突变压改变群体的基因频率Pn = (1-P0)n 遗传重组交换 染色体的自由组合 染色单体间的交换 分子克隆和转基因技术(