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大肠杆菌基因工程1;基因工程课程内容;回顾:基因工程的基本目的是什么?;问题:如何利用基因资源?;基因工程主要宿主系统;主要的蛋白质生产宿主系统;表达载体的基本条件(关键元件);表达载体的基本条件(关键元件) ;典型的原核表达载体;典型的原核表达载体;典型的真核表达载体;第三章 大肠杆菌基因工程;四、工程菌构建、分析、发酵与产物分离纯化;一、 大肠杆菌表达系统的优缺点;原核细胞与真核细胞的差别;生长速度惊人的大肠杆菌;遗传背景清楚(4405个ORF),便于基因操作;胞内缺乏高效的表达产物折叠机制(形成包涵体),分泌机制不完善;;二、大肠杆菌系统高效表达原理;大肠杆菌系统表达载体的基本元件;;;;;;启动子保守序列;启动子的筛选;;启动子;P;P;P;P;;Plac;;;启动子;受 lacI 阻遏蛋白调控;;发酵罐中大规模升温困难
如何解决?;T7启动子
——来自T7噬菌体的异源启动子;T7启动子——最成功的启动子 ;T7启动子调控模式 ;T7启动子调控模式 ;T7启动子调控模式 ;T7启动子调控模式 ;2、终止子;防止转录过头策略 ;终止子;3、核糖体结合位点;核糖体结合位点;核糖体结合位点;核糖体结合位点;核糖体结合位点;4、质粒拷贝数;质粒拷贝数;5、密码子;密码子;密码子;思考题(1.大肠杆菌表达系统高效表达原理);感谢观看!
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