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务实、求精、团结、开拓
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实验五 水五日生化需氧量(BOD5)的测定
1 目的
1.1 理解BOD的含义及测定条件;
1.2 了解水样预处理的道理与预处理方法。
2 方法原理
生物化学需氧量(BOD)定义为:在规定的条件下,微生物分解存在水中的某些可氧化物质,特别是有机物所进行的生物化学过程所消耗 的溶解氧量。 该过程进行的时间很长,如在20℃培养条件下,全过程需100天,根据目前国际统一规定,在20±1℃的温度 下,培养五天后测出的结果,称为五日生化需氧量,记为BOD5,其单位用质量浓度
对于一般生活污水和工业废水,虽然含较多有机物,如果样品含有足够的微生物和具有足够氧气,就可以将样品直接进行测定,但为了保证微生物生长的需要,需加入一定量的无机营养盐(磷酸盐、钙、镁和铁盐)。
某些不含或少含微生物的工业废水、酸碱度 高的废水、高温或氯化杀菌处理的废水等,测定前应接入可以分解水中有机物的微生物,这种方法称为接种。 对于一些废水中存在着难被一般生活污水中微生物以正常速度 降解的有机物或含有剧毒物质时,可以将水样适 当稀释,并用驯化后含有适 应性微生物的接种水进行接种。
一般检测水质的BOD5只包括含碳有机物质氧化的耗 氧量和少量无机还原性物质的耗 氧量。 由于许多二级生化处理的出水和受污染时间较长的水体中,往 往 含有大量硝化微生物。 这些微生物达到一定数量就可以产生硝化作用的生化过程。 为了抑制硝化作用的耗 氧量,应加入适 量的硝化抑制剂。
3 适 用范 围
BOD5为2—1000mg/L水样,超过1000mg/L的水样,应适 当稀释。
4 主要仪器及设备
使 用的玻璃仪器皿在实验前应认真清洗,防止油污、沾尘 。 玻璃器皿干燥后方能使 用。
常用实验室设备如下:
4.1 生化培养箱 温度 控制在20±l℃,可连续无故障运行。
4.2 充氧设备 充氧动力常采用无油空气压缩机(或隔膜泵、或氧气瓶、或真空泵)。 充氧流程可分为正压、负压充氧两 种流程。
4.3 BOD培养瓶:容 积550±1mL。
4.4 样品运输贮藏箱:温度 保持0~4℃
4.5 250mL溶解氧瓶或具塞 试剂瓶2~6个。
4.6 50mL滴定管2支。
4.7 1mL移 液管3支,25mL、100mL移 液管各1支。
4.8 10mL、100mL量筒各1个。
4.9 250mL碘量瓶2个。
5 试剂
采用分析纯 试剂。 实验用水采用重蒸 蒸 馏水。
5.1硫酸锰溶液
将MnSO4·4H2O 480g或MnSO4·2H2O 400g溶于蒸 馏水中,过滤后稀释成100mL。 (此溶液中不能含有高价锰,试验方法是取少量此溶液加入碘化钾及稀硫酸后溶液不能变成黄色,如变成黄色表示有少量碘析出,即表示溶液中含有高价锰)。
MnO+2I-+6H+=I2+Mn2++3H2O
5.2碱性碘化钾溶液
溶解500g氢氧化钠于300—400mL蒸 馏水中,冷至室温。 另外溶解300g碘化钾于200mL蒸 馏水中,慢慢加入已冷却的氢氧化钠溶液,摇匀 后用蒸 馏水稀释至1000mL(强碱性溶液腐蚀性很大,使 用时注意勿溅在皮肤 或衣服上),如有沉 淀,则放置过夜取上清液,贮藏于塑料瓶或棕色试剂瓶中(用棕色试剂瓶时要用橡胶瓶塞 )。
5.3 浓硫酸
比重1.84,强酸腐蚀性很大,使 用注意勿溅在皮肤 或衣服上。
5.4 1%淀粉指示液
称取2g可溶性淀粉,溶于少量蒸 馏水中,用玻璃棒调成糊状:慢慢加入(边加边搅拌)刚煮沸的200mL蒸 馏水中,冷却后加入0.25g水杨酸或0.8g氯化锌ZnCl2防腐剂。 此溶液遇碘应变为蓝色,如变成紫色表示已有部分变质,要重新配制。
5.5 (1+1)硫酸溶液
将浓硫酸(比重1.84)与水等体积混合。
5.6 2 mol/L(1/2 H2SO4)
5.7盐溶液
下述溶液至少可稳定一个月,应贮存在玻璃瓶内,置于暗处。 一旦发现有生物滋长迹象,则应弃去不用。
5.7.1 磷酸盐:缓冲溶液。
将8.5g磷酸二氢钾(KH2PO4)、21.75g磷酸氢二钾(K2HPO4)、33.4g七水磷酸氢二钠(NaH2PO4·7H2O)、和1.7g氯化铵(NH4Cl)溶于500mL水中,西是指1000mL。
此缓冲溶液的pH应为7.2。
5.7.2 七水硫酸镁:22.5g/L溶液
将22.5g七水硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶于水中,稀释至1000mL并混合均匀 。
5.7.3 氯化
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