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常将有日思无日，莫待无时思有时。——《增广贤文》 高中生物选修三知识点总结 基因工程是高中生物核心知识点。基因工程是指按照人们的愿望，进行严 格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造 出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。下面给大家分享一些关于高中 生物选修三知识点，希望对大家有所帮助。 基因工程 (DNA 重组技术)：体外、定向、分子水平 基本工具：限制性核酸内切酶 (限制酶)来自原核细胞，识别双链 DNA 分子 的某种特定的核苷酸序列，使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二 酯键断开。 DNA 连接酶： E ·coliDNA 连接酶(只黏性末端) T4DNA 连接酶 (黏、平末端也可但效率低) 载体：质粒、入菌体的衍生物、动植物病毒 条件：①能在宿主细胞内稳定存在复制表达 ②一种或多种限制酶切点 ③标记基因 (抗生素抗性基因、荧光基因) 基本操作程序： 1、 目的基因的获取： (人工合成、体内提取) ①从基因文库获取 ②PCR 技术扩增目的基因：模板、Taq 酶(热稳定 DNA 聚合酶)、原料能量 (dXTP)、引物 (过量) 五物混合，加热至 90~95℃ ，DNA 解旋，冷却到 55~60℃ ，引物与互补 DNA 链结合，加热至 70~75℃， Taq 酶从引物起始互补链的合成 ③人工化学合成：基因比较小，核苷酸序列已知 2、基因表达载体的构建： (基因工程的核心) 启动子：DNA 片段，基因的首端，RNA 聚合酶识别和结合的部位 以家为家，以乡为乡，以国为国，以天下为天下。——《管子·牧民》 好学近乎知，力行近乎仁，知耻近乎勇。——《中庸》 目的基因 终止子：DNA 片段 ，基因的尾端 标记基因：鉴别受体细胞中是否含有外源基因，从而将含有外源基因的细 胞筛选出来。 (复制原点：仅自我复制的需要，整合到宿主染色体上再表达的不需要) 3、将目的基因导入受体细胞： 转化：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的 过程。 (1)导入植物细胞 (体细胞、受精卵) ①农杆菌转化法 (双子叶植物、裸子植物) 受损，伤口细胞分泌酚类化合物，吸引农杆菌移向，Ti质粒上 T-DNA(上插 目的基因)转移至受体细胞整合到受体细胞染色体上 ②基因枪法 (单子叶植物) ③花粉管通道法 (2)导入动物细胞 (受精卵)显微注射技术 (3)导入微生物细胞 优点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少、对人体无害 (大肠杆菌) 步骤：Ca2+ 处理细胞，使其成为感受态细胞，重组表达载体 DNA 分子溶于 缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收 DNA 分子 4、 目的基因的检测与鉴定： ①DNA 分子杂交技术：转基因生物的染色体 DNA 上是否插入了目的基因(目 的基因是否进入原核细胞) 转基因生物的染色体 DNA(原核质粒)+有同位素标记的目的基因 ②RNA 分子杂交技术： 目的基因是否转录出了mRNA 转基因生物的 mRNA+有 同位素标记的目的基因 ③抗原-抗体杂交： 目的基因是否翻译成蛋白质 转基因生物的蛋白质+相应 的抗体 人之为学，不日进则日退，独学无友，则孤陋而难成；久处一方，则