蛋白质的化学修饰.pptxVIP

第1页/共25页蛋白质的化学修饰第2页/共25页用水溶性碳二亚胺作催化剂，通过胺专一地修饰蛋白质中的羧基。+碳二亚胺++ HX形成相应酰胺重排三、羧基的修饰第3页/共25页四、巯基的修饰由于半胱氨酸时蛋白质中反应性最强的残基，所以很多试剂可用来修饰巯基侧链。1.碘乙酸、碘乙酰胺或环乙烯亚胺常用的有三类：2.马来酰亚胺或马来酸酐3.有机汞试剂（一）1类试剂是烷化剂，此类试剂还能与甲硫氨酸、赖氨酸或组氨酸反应。pH﹥7半胱氨酸碘乙酸副反应：pH﹥5.5组氨酸第4页/共25页pH=2～8.5甲硫氨酸pH=8.5（二）2类试剂能与巯基形成对酸稳定的衍生物，而与其它基团形成的产物则对酸不稳定。pH ﹥5+半胱氨酸马来酸酐副反应：pH ﹥7+（三）3类试剂对巯基专一性最强。常用的是对氯汞苯甲酸，S-汞-N-5-二甲氨基萘磺酰半胱氨酸是对氯汞苯甲酸的衍生物，也可与巯基反应。第5页/共25页+对氯汞苯甲酸+S-汞-N-5-二甲氨基萘磺酰半胱氨酸（四）5，5′-二硫双硝基苯甲酸（DTNB）也常用于修饰巯基，它与半胱氨酸形成混合二硫化物。释放出的2-硝基-5-硫代苯甲酸阴离子在412nm处有吸收，可用光谱法测定其含量。pH ﹥6.5+DTNB+2-硝基-5-硫代苯甲酸第6页/共25页用碘乙酸烷化组氨酸残基可得单取代或双取代衍生物。常用试剂是焦碳酸二乙酯和碘乙酸。1-羧乙基组氨酸碘乙酸1，3-二羧乙基