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绿叶中色素的提取和分离
实验:提取和分离绿叶中的色素
实验原理:
绿叶中的色素可以溶解在无水乙醇等有机溶剂中,因此可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。绿叶中的色素不止一种,它们都能溶解在层析液中。然而,它们在层析液中的溶解度不同;溶解度高的随层析液在滤纸上扩散的快;反之则慢。这样,几分钟之后绿叶中的色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。溶解度最高的是胡萝卜素,它随层析液在滤纸上扩散的最快;叶黄素和叶绿素a的溶解度次之,叶绿素b的溶解度最低,扩散的最慢。
实验目的:
1. 掌握提取和分离绿叶中色素的方法。
2. 探究绿叶中含有几种色素。
实验材料和用具:
材料:新鲜的绿色叶片(如菠菜的绿叶)、无水乙醇、层析液、SiO2、CaCO3。
用具:干燥的定性滤纸、烧杯(100ml)、小试管、试管架、培养皿盖、棉塞、研钵、玻璃漏斗、尼龙布、毛细吸管、剪刀、药勺、量筒(10ml)、天平、铅笔。
实验步骤:
1. 提取绿叶中的色素
取5g新鲜绿叶,剪碎,放入研钵中。向研钵中加入少许SiO2、CaCO3,再加入10ml无水乙醇,进行快速、充分的研磨。将研磨液迅速倒入玻璃漏斗(漏斗基部放一块单层尼龙布)中进行过滤。将滤液收集到小试管中,及时用棉塞将试管口塞严。
2. 制备滤纸条
将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条,将滤纸条的一端剪去两角,并在距这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。
3. 画滤液细线
用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀地画出一条细线。待滤液干后,再画一两次。
4. 分离绿叶中的色素
将适量的层析液倒入烧杯中,将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)略微倾斜靠着烧杯的内壁,轻轻插入层析液中,随后用培养皿盖盖住烧杯口。注意,不能让滤液细线触及层析液。
5. 观察与记录
几分钟后,打开培养皿盖,取出滤纸条,干燥后观察滤纸条上的色素带,以及每条色素带的颜色和宽度,将观测结果记录下来。
实验关键点:
1. 选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片,如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。
2. 画滤液细线时,应该保持线条细、直、颜色浓绿。在重复画线之前,必须等待上一次画线干燥,然后可以重复2-3次。
3. 在层析过程中,滤液细线不应接触到层析液。
实验总结:
1. 在研磨绿叶时,加入少量SiO2可以使研磨更充分,加入少量CaCO3可以保护色素不受破坏,加入10ml无水乙醇可以溶解色素,方便提取。
2. 由于无水乙醇和层析液都是易挥发且层析液有一定毒性的有机溶剂,因此在研磨时要快速进行,收集的滤液要用棉塞塞住,层析时要加盖,尽量减少有机溶剂的挥发。
3. 使用毛细吸管画滤液细线时,线条越细越直效果越好,重复划几次可以使滤液细线中含有更多的色素。
4. 如果层析液浸没了滤纸条上的滤液细线,滤纸条上就不会出现色素带,因为滤液细线中的色素溶解在了烧杯中的层析液中,会导致色素带不清晰,影响整个实验的效果。
课堂巩固练习:
1. 答案:C。加入少量CaCO3的作用是调节PH值,保护叶绿素不被破坏。
2. 答案:B。在滤纸条上出现的四条色素带,从上而下依次为胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素。
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