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实验二与的化学显色反应 第一页，共十四页，2022年，8月28日 作业： 1、说明DNA和RNA的亚细胞定位在哪里?为什么？ 2、解释一下本实验中设立对照组的必要性是什么，三氯乙酸和丙酮各起什么作用 第二页，共十四页，2022年，8月28日 实验原理 Unna染色法 主要成分：甲基绿-派洛宁混合染料（碱性染料） 原理：核酸是酸性的，它们对于碱性染料具有亲和力，但是DNA和 RNA对甲基绿-派洛宁混合染料的亲和力不同，而使这两种染料对两类核酸具有了选择性。DNA被甲基绿染成绿色，RNA被派洛宁染成红色，这样就能使细胞中两种核酸分布显示出来 第三页，共十四页，2022年，8月28日 “样品的固定” 王金发 书 p37 目的： 迅速杀死细胞，稳定细胞的化学成分，以便在后面的处理、切片时不被破坏。 固定使得细胞大分子交联而保持在一定位置上，不至于在后面的染色等处理过程中移位或丢失而产生人工假象。 常用的固定液：(醛类：甲醛、戊二醛) 第四页，共十四页，2022年，8月28日 Unna染色法实验步骤 撕取洋葱内表皮 ↓ 小离心管Carnoy固定剂 15 min ↓ 95%酒精复水5 min ↓ 70%酒精复水5 min ↓ H2O 5min ↙ ↘小离心管 表面皿中实验组 对照组→ 5% 三氯乙酸（TCA） ↙ 90℃保温,15min H2O 5min ↙ Unna 染液 20min(室温) ↓ H2O漂洗几秒后 丙酮 分色6-10Sec ↓ H2O洗片刻 ↓ 水压片分别镜检观察 Unna 法 第五页，共十四页，2022年，8月28日 背景知识 核酸是一种线形多聚核苷酸，它的基本单位是核苷酸。细胞核内存在有两种核酸：DNA和RNA，它们具有类似的化学组成，即均由含氮碱基，戊糖和磷酸组成，可表示如下: 磷酸 核糖（RNA） 核酸 核苷酸 戊糖 脱氧核糖（DNA） 核苷 A、G、C、U (RNA) 碱基（嘌呤/嘧啶） A、G、C、T（DNA） 第六页，共十四页，2022年，8月28日 DNA是染色体的主要成分，在细胞核内呈双螺旋结构。 RNA是单链线形，主要有三种类型:
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