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1.1 生物技术的定义
第一章 绪论
指人们以现代生命科学为基础,结合其他基础学科的科学原理,采用先进的工程技术手段,按照预先设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。 二、现代生物技术研究和应用进展
现代生物制药与医药领域:医药生物技术是生物技术领域中最活跃、产业发展最迅速、效益最显著的领域其应用涉及到新药开发、新诊断技术、预防措施及新的治疗技术
农业领域:应用生物技术可以培育出优质、高产、抗病虫、抗逆的农作物以及畜禽、林 木、鱼类等新品种;扩大食饲料来源,满足人类日益增长的需要;进行无废物的良性循环, 减少环境污染,充分利用各种资源,解决能源短缺问题。
环境工程领域:利用生物有机体的吸收、吸附、积累、降解、结合等机能达到降低或净化环境中污染成分的目的。
食品工业领域:食品生物技术是现代生物技术在食品领域中的应用,是以现代生命科学的研究成果为基础,结合现代工程技术手段和其他学科的研究成果,用全新的方法和手段设 计新型的食品和食品原料。
三、食品生物技术在食品工业发展中的地位和作用
基因工程在食品工业发展中的核心位置:可以根据需要人为地设计新型的食品及食品原料,可以为发酵工程提供更优良的工程菌株。食品发酵工程在食品工业中占有举足轻重的作用:食品发酵技术是人类制造食品最重要的技术手段之一,在生产食品添加剂等食品生产原料方面更是其他技术无法替代的。细胞工程在食品工业发展中的潜在重要作用:同食品工业密切相关的是离体细胞的培养及次生代谢物的产生。蛋白质工程和酶工程在食品工业中的作用将逐渐加强:酶在食品中的应用非常广泛,蛋白质工程技术的发展,将对新型酶的开发和对酶加工性能的改善有很大的促进作用。生物工程下游技术对食品工业发展的推动作用:现代分离技术可以很好地克服常规提取技术的缺点。
第二章 基因工程与食品产业
基因工程研究的理论依据
(1)不同基因具有相同的物质基础:具有遗传功能的特定核苷酸序列的 DNA 片段(2)基因是可切割的:大多数基因彼此之间存在着间隔序列(3)基因是可以转移的:基因可在不同生物之 间转移,或在染色体DNA 上移动(4)多肽与基因之间存在对应关系:普遍认为,一种多肽就有一种相应的基因(5)遗传密码是通用的:一系列三联密码子同氨基酸之间的对应关系,在 所有生物中都是相同的(6)基因可通过复制把遗传信息传递给下一代:经重组的基因一般来 说是能传代的
3.1 基因工程的工具酶(1)限制性内切酶(2)DNA 连接酶:能将两段DNA 拼接起来的酶称为 DNA 连接酶。该酶催化DNA 相邻的 5 磷酸基团和 3 羟基末端之间形成磷酸二酯键,将DNA 单链缺口封合起来。
DNA 连接酶只能封闭双螺旋DNA 骨架上的缺口,而不能封闭裂口。
粘性末端 DNA 片段的连接:具粘性末端的DNA 片段的连接比较容易,也比较常用。但是,在连接反应混合物中,具有粘性末端的载体DNA 分子会发生自我环化作用,并在连接酶的作用下重新变成稳定的共价闭合的环形结构。这样,就会使只含有载体分子的转化子克隆的“本底”比例大幅上升,最终给重组 DNA 分子的筛选工作带来麻烦。用碱性磷酸酶预先处理线性的载体DNA 分子,以移去其末端的 5 磷酸基团,可以克服这一缺点。
平末端DNA 片段的连接: 1)同聚物加尾法:利用互补的同聚物序列之间的退火作用完成的连接。其核心部分是,利用末端脱氧核苷酸转移酶(能够在无模板链的情况下,将核苷酸加到 DNA 分子单链延伸末端的 3 -OH 基团上)转移核苷酸的特殊功能。 2)接头连接法:DNA
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接头,是一类人工合成的一头具有某种限制酶粘性末端,另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。(3)DNA 聚合酶:DNA 聚合酶:具有催化 DNA 体外合成反应作用的酶称为DNA 聚合酶。这类酶的特点在于,能够把脱氧核苷酸连续地加到双链 DNA 分子引物链的3 -OH 末端,催化核苷酸的聚合作用。DNA 聚合酶作用时大多都需要模板,合成产物的序列与模板互补。
3.2.1.质1 粒的一般生物学特性
环形双链的质粒DNA 分具有三种不同的构型:共价闭合环形 DNA ;开环 DNA ;线形 DNA 。质粒DNA 的复制类型:根据寄主细胞所含拷贝数的多少,可将质粒分成两个不同的复制型: 一种是低拷贝数的质粒(1-3份拷贝),称为“严密型”复制控制的质粒;另一种是高拷贝数的 质粒(10-60份拷贝),称为“松弛型”复制控制的质粒。
拷贝数的常用定义:生长在标准的培养基条件下,每个细菌细胞中所含有的质粒DNA 分子的数目。
一种质粒究竟是属于严密型还是松弛型并非绝对的,还受到寄主的控制。例如,R1 质粒 大肠杆菌寄主(严密型)、奇异变型杆菌寄主(松弛型)。
3.2.1.质2 粒载体的构建及重要的质
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