动物细胞融合与单克隆抗体.pptVIP

优选动物细胞融合与单克隆抗体 当前第1页\共有33页\编于星期五\18点 杂种植株 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 脱分化 愈伤组织 再分化 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞A 原生质体B 原生质体A 杂种细胞AB 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 方法？ 促进融合的方法？ 融合完成的 标志 植物细胞B 植物体细胞杂交技术过程 当前第2页\共有33页\编于星期五\18点 成果和未解决的问题 成果：克服不同生物远缘杂交的障碍，出 现自然界没有的新品种。 未解决的问题：未能让杂种植物按照人们 的需要表现出亲代的优良。 当前第3页\共有33页\编于星期五\18点 如果将牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶啦！ 动物细胞也能融合吗？ 当前第4页\共有33页\编于星期五\18点 一、动物细胞融合 细胞A 细胞B 杂交细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒 当前第5页\共有33页\编于星期五\18点 不同DNA的两个细胞 灭活病毒诱导细胞融合 融合后的细胞进行有丝分裂 1、动物细胞融合过程 当前第6页\共有33页\编于星期五\18点 思考题 1、植物体细胞杂交前做何处理？怎么处理？ 去壁 酶解法，如纤维素酶或果胶酶 2、动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？ 无需，因为动物细胞无细胞壁 3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？ 离心、振动、电激等物理方法；PEG等化学方法 当前第7页\共有33页\编于星期五\18点 4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法？ 能 还可以利用灭活的病毒进行诱导 5、植物体细胞杂交过程应先进行原生质体融合再进行组织培养形成完整的个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？ 不能 6、你能归纳出什么叫做动物细胞融合吗？ 思考题 当前第8页\共有33页\编于星期五\18点 2、动物细胞融合的概念 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程。 当前第9页\共有33页\编于星期五\18点 7、你推测一下动物细胞融合有哪些方面的应用吗？ 思考题 利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞 8、在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用？ 生产单克隆抗体 当前第10页\共有33页\编于星期五\18点 细胞融合与融合诱导细胞融合物质： 诱导剂：仙台病毒、聚乙二醇诱导细胞融合的仙台病毒必须灭活。 思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？不灭活行吗？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂 质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭 活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。 细胞融合技术应用于哪些方面？ 细胞学、遗传学、免疫学及制备单克隆抗体。 当前第11页\共有33页\编于星期五\18点 1.抗体是由何种细胞产生的？ 2. 如何得到抗体？ 提问 ？ 二、单克隆抗体 当前第12页\共有33页\编于星期五\18点 抗体 1、抗原 动物体内 刺激 浆细胞 抗原 动物体内 刺激 浆细胞 抗体 抗原不纯 抗体不纯 筛选单一浆细胞 不能增殖产生大量抗体 2、特异性差、纯度低； 产量低、反应不够灵敏 二、单克隆抗体 当前第13页\共有33页\编于星期五\18点 设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖 如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？ 杂种细胞 二、单克隆抗体 当前第14页\共有33页\编于星期五\18点 ？ ？ 诱导其融合的方法有哪些？ 抗原 浆细胞 2.制备过程： 二、单克隆抗体 当前第15页\共有33页\编于星期五\18点 B BB B瘤 瘤瘤 瘤 细胞融合后培养液中有几种细胞？ 筛选（特定的 选择性培养基） 杂种细胞 当前第16页\共有33页\编于星期五\18点 整个制备过程要经过几次筛选? （第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种）， 第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。） 当前第17页\共有33页\编于星期五\18点 3.单克隆抗体的应用： ①作为诊断试剂 ②用于治疗疾病