DB64 536_2009草莓脱毒种苗培养及繁育技术规程.pdf

DB64宁夏回族自治区地方标准DB64/T 5362009草莓脱毒种苗培养及繁育技术规程2009-01-07发布2009-01-07实施宁夏回族自治区质量技术监督局发布 DB64/T 536—2009目次目前言II1范围2规范性引用文件3术语和定义4分类与分级5要求....6脱毒种苗的培育7病虫害防治. DB64/T 536—2009前言本标准由宁夏农林科学院提出。本标准由宁夏农牧厅归口。本标准主要起草单位：宁夏农业生物技术重点实验室。本标准主要起草人：宋玉霞、王敬东、刘宝山、马洪爱、陈晓军、高晓原、郭生虎、甘晓燕、朱永新、惠红霞、关雅静、李苗，11 DB64/T 5362009草莓脱毒种苗培养及繁育技术规程1范围本标准规定了草莓脱毒种苗的定义、繁育技术、分类、分级、质量要求、栽培技术、运输与贮存。本标准适用于宁夏各地采用草莓花药培养脱毒及种苗繁育。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本规范的引用而成为本规范的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘识的内容）或修订版均不适用于本规范，然而，鼓励根据本规范达成协议的各方研究可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本规范。GB4285农药安全使用标准GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则NY/T496肥料合理使用准则通则NY 5104无公害食品草莓产地环境条件NY 5105无公害食品草莓生产技术规程3术语和定义本标准采用下列术语和定义，3.1草莓脱毒苗经组织培养脱毒处理或直接引进，经检测后确认不携带草莓斑驳病毒、草莓罐脉病毒、草莓皱缩病毒、草莓轻型黄边病毒的种苗。3.2草莓脱毒组培（瓶）苗指采用植物组织培养的方法，经检测获得的不带草莓斑驳病毒、草莓镶脉病毒、草莓皱缩病毒、草莓轻型黄边病毒的组培（瓶）苗。3.3草莓脱毒原原种苗指将草莓脱毒组培（瓶）苗移栽于无草莓病源、虫源的隔离区成活的植株，3.4草莓脱毒原种苗指由草莓脱毒原原种苗葡鼠茎基繁殖的植株。3.5草莓脱毒生产苗指由草莓脱毒原种苗匍茎繁殖用于生产草莓的植株。4分类与分级脱毒苗按繁育过程可分为脱毒组培（瓶）苗、脱毒原原种苗、脱毒原种苗和脱毒生产苗四类。脱毒组培（瓶）苗按质量要求分为一级、二级、三级。5要求 DB64/T1产地环境5.1.1产地环境质量产地环境条件应符合NY5104的规定。5.1.2土壤条件土层较深厚，肥沃，结构疏松，中性士壤，有机质含量在2.5%以上，且排灌方便。5.2施肥原则及允许使用的肥料5. 2. 1施肥原则按NY/T496规定执行。施用的肥料应是在农业行政主管部门已经登记或免于登记的肥料和各种衣家肥。限制使用含氯复合肥。不准施用未经无害化处理的城市废弃物制成的肥科。5.2.2允许件使用的肥料种类5.2.2.1有机肥料包括堆肥、渴肥、既肥、沼气肥、绿肥、作物粘杆肥、泥炭肥、饼肥、腐殖酸类肥、人畜废弃物加工而成的肥、氨基酸类肥等。5.2.2.2无机肥料包括氮肥、磷肥、锌肥、硫肥、钙肥、镁肥及复合（混）肥、微量元素类等。6脱毒种苗的培育6.1脱毒组培（瓶）苗的培育6.1.1培养基采用改良MS培养基。6.1.2材料准备依据花器的形态特征及镜检取样，将取回的新鲜花蕾置4℃冰箱预处理2天3天。6.1.2.1取样时间选择草莓盛花期进行取样。宁夏多为日光温室栽培，在12月中旬～1月上旬，上午9时～11时在温室取样。6.1.2.2取样方法a）草莓花蕾的形态花等未开放，花蕾（直径3毫米～5毫米）咯长于花冠或花冠刚露白，花冠白色或淡绿色且不松动。花药微（淡）黄而充实。b）镜检镜检确定为花粉单核靠边期的花药作为外植体。6.1.2.3接种方法接种时在超净1.作台上先将外植体用75%的酒精浸池10秒，再用0.1%升乘消毒8分钟，用无围水冲洗3遍5遍，手捏花柄，用眼镊刹掉花冠和片，轻轻取出花药放入已灭菌的培养基上，一朵花（花 DB64/T 536—2009药20枚左右）接一瓶，切勿将花丝和花冠以及其它二倍体组织接入，6.1.3培养条件诱导培养时需暗培养，培养温度为28℃土2℃C。分化培养和维代培养需光培养，用20001x～30001x日光灯，光照10小时～12小时，培养温度为25℃±2℃。6.1.4诱导培养接完一朵花立即用封口膜封闭瓶口，先将培养物放入人工气候箱32℃高混暗培养7天～10天，在28℃继续暗培养，接种10天～12天后开始产生愈伤组织，30天～40天达到高峰期，90天后停止。6.1.5分化培养当愈伤组织长到2毫米～3毫米时，选择质地致密、色泽鲜明，呈颗粒状的愈伤组织，在无菌条件下转到分化培养基诱导芽的分化，约30天～40天开始分化并形成绿芽，有些材料2个～4个月才形成绿芽。培养温度为25℃±2℃。6.1.6病毒检测以愈伤组织分化苗的叶片作为