NYT 4354-2023 禽蛋中卵磷脂的测定 高效液相色谱法.docxVIP

ＩＣＳ 65.020.01 备案号：XXXX-XXXXCCS B 04 备案号：XXXX-XXXX 中华人民共和国农业行业标准 ＮＹ ／ Ｔ 4354—2023 禽蛋中卵磷脂的测定 高效液相色谱法 Determination of phosphatidylcholine in eggs by high performance— liquid chromatography 2023 － 04 － 11 发布 2023 － 08 － 01 实施 中华人民共和国农业农村部 发 布 NY/T ４３５４—２０２３ 前 言 本文件按照 GB/T１１—２０２０ ?标准化工作导则 第１部分:标准化文件的结构和起草规则?的规定起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部农产品质量安全监管司提出. 本文件由农业农村部农产品营养标准专家委员会归口. 本文件起草单位:江苏省家禽科学研究所、农业农村部家禽品质监督检验测试中心(扬州)、谱尼测试集团江苏有限公司. 本文件主要起草人:葛庆联、唐修君、马丽娜、高玉时、刘茵茵、陆俊贤、樊艳凤、贾晓旭、陈大伟、张静、 周倩、施祖灏、唐梦君、张小燕、黄胜海、马尹鹏. Ⅰ NY/T ４３５４—２０２３ 禽蛋中卵磷脂的测定 高效液相色谱法 １ 范 围 本文件规定了禽蛋中卵磷脂[LＧαＧ磷脂酰胆碱(PC)]的高效液相色谱测定方法.本文件适用于鸡蛋、鸭蛋、鹅蛋、鸽蛋、鹌鹑蛋等禽蛋. ２ 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件. GB/T６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法 ３ 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义. ４ 原 理 试样经正相色谱柱分离,蒸发光散射检测器检测,保留时间定性,外标法定量. ５ 试剂和材料 ５１ 试剂 除非另有规定,仅使用分析纯试剂. ５１１ 水:GB/T６６８２,一级. ５１２ 乙醚(C４H１０O). ５１３ 无水乙醇(C２H６O). ５１４ 三氯甲烷(CHCl３):色谱纯. ５１５ 甲醇(CH４O):色谱纯. ５１６ 正己烷(C６H１４):色谱纯. ５１７ 异丙醇(C３H８O):色谱纯. ５１８ 乙酸(C２H４O２):色谱纯. ５１９ 三乙胺(C６H１５N):色谱纯. ５２ 溶液配制 ５２１ 三氯甲烷∶甲醇溶液(２∶１):分别量取２００ mL 三氯甲烷(５１４)和１００ mL 甲醇(５１５)置于同一棕色试剂瓶中,混匀. ５２２ 乙醚∶无水乙醇溶液(１∶１):分别量取５００ mL 乙醚(５１２)和５００ mL 无水乙醇(５１３)置于同一棕色试剂瓶中,混匀. ５３ 标准品 LＧαＧ磷脂酰胆碱(C４２H８０NO８P,CAS号:８００２Ｇ４３Ｇ５):含量≥９９％,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质. ５４ 标准溶液的制备 ５４１ LＧαＧ磷脂酰胆碱标准储备液:称取４０ mg(精确至００１ mg)LＧαＧ磷脂酰胆碱置于１０ mL 棕色容量 １ NY/T ４３５４—２０２３ 瓶中,用三氯甲烷∶甲醇溶液(５２１)溶解并定容至刻度,配制成浓度为４０ mg/mL 的 LＧαＧ磷脂酰胆碱标准储备液,－１８ ℃以下冷冻保存,有效期６个月. ５４２ LＧαＧ磷脂 酰胆碱标准工作溶液:量 取标准储备液 (５４１)２５ μL、１２５ μL、２５０ μL、３７５ μL 和 ５００μL,用三氯甲烷∶ 甲醇溶液(５２１)稀释至１ mL,配制成０１ mg/mL、０５ mg/mL、１０ mg/mL、 １５ mg/mL、２０ mg/mL 系列标准工作溶液. ６ 仪器和设备 ６１ 高效液相色谱仪:配有蒸发光散射检测器. ６２ 天平:感量为１ mg和００１ mg. ６３ 匀浆机:转速６５００r/min ~ ２２０００r/min. ６４ 涡旋混匀器:转速３０００r/min. ６５ 离心机:转速１００００r/min. ６６ 氮吹仪. ６７ 滤膜:孔径０２２μm. ７ 试样的制备与保存 ７１ 试样的制备 ７１１ 取６枚~１０枚供试禽蛋,去壳,并使均质,总质量不少于２００g,作为全蛋试样. ７１２ 取６ 枚~１０ 枚供试禽蛋,去壳和蛋清,用滤纸吸干蛋黄表面的蛋清,并使均质,总质量不少于 ２００g,作为蛋黄试样. ７２ 试样的保存 －１８ ℃以下保存. ８ 测定步骤 ８１ 提取 称取１０g全蛋试样(７１１)或０５g蛋黄试样(７１２)(精确到０００１g),于５０ mL 离心管中,加入 １５ mL