NYT 4356-2023 植物源性食品中甜菜碱的测定 高效液相色谱法.docxVIP

ＩＣＳ 65.020.01 备案号：XXXX-XXXXCCS B 04 备案号：XXXX-XXXX 中华人民共和国农业行业标准 ＮＹ ／ Ｔ 4356—2023 植物源性食品中甜菜碱的测定高效液相色谱法 Determination of betaine in foods of plant origin by high performance liquid chromatography 2023 － 04 － 11 发布 2023 － 08 － 01 实施 中华人民共和国农业农村部 发 布 NY/T ４３５６—２０２３ 前 言 本文件按照 GB/T１１—２０２０?标准化工作导则 第１ 部分:标准化文件的结构和起草规则?的规定起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部农产品质量安全监管司提出. 本文件由农业农村部农产品营养标准专家委员会归口. 本文件起草单位:农业农村部食物与营养发展研究所、北京市营养源研究所有限公司、内蒙古蒙牛乳 业(集团)股份有限公司、中国合格评定国家认可委员会、北京城市学院、北京林业大学、大连工业大学、北 京工商大学、北京市农林科学院农产品加工与食品营养研究所、唐山市食品药品综合检验检测中心、北京 东方倍力营养科技有限公司. 本文件主要起草人:朱大洲、崔亚娟、杨春雪、孔凡华、徐佳佳、孙婉秋、白沙沙、罗欣、特日格乐、王佳、 林立民、马利军、李宏、田荣荣、杨清、孟冬、杜明、李赫、刘光敏、王磊、蒋峰、蒋彤. Ⅰ NY/T ４３５６—２０２３ 植物源性食品中甜菜碱的测定 高效液相色谱法 １ 范 围 本文件规定了植物源性食品中甜菜碱的高效液相色谱测定方法. 本文件适用于植物源性食品中甜菜碱含量的测定. ２ 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件. GB/T６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法 ３ 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义. ４ 原 理 试样中甜菜碱,经甲醇提取后,采用配有紫外检测器或者二极管阵列检测器的高效液相色谱仪在波长 １９６nm 处测定;根据色谱峰的保留时间定性,外标法定量. ５ 试剂与材料 ５１ 试剂 除非另有说明,本方法所用试剂为分析纯,水为 GB/T６６８２规定的一级水. ５１１ 甲醇(CH３OH). ５１２ 乙腈(C２H３N):色谱纯. ５２ 标准品 甜菜碱标准品:C５H１１NO２,CAS号:１０７Ｇ４３Ｇ７,纯度≥９８０％,或经国家认证并授予标准物质证书的标 准物质. ５３ 标准溶液的配制 ５３１ 标准储备溶液(１０ mg/mL):准确称取甜菜碱标准品１００ mg(精确到０１ mg),用水溶解转移至 １００ mL 容量瓶并定容.转移至于棕色玻璃瓶,于４ ℃下储存. ５３２ 标准工作溶液:分别吸取标准储备溶液０１ mL、０５ mL、１０ mL、５０ mL、１００ mL 于１０ mL 容量瓶,用甲醛(５１１)定容至刻度,得００１ mg/mL、００５ mg/mL、０１ mg/mL、０５ mg/mL、１０ mg/mL的标准工作溶液,现用现配. ５４ 材料 有机相微孔滤膜:孔径为０４５μm. ６ 仪器设备 ６１ 高效液相色谱仪:配紫外检测器或者二极管阵列检测器. ６２ 天平:感量０００００１g,００００１g. ６３ 粉碎机. ６４ 匀浆机. ６５ 恒温振荡水浴锅,３０ ℃~１００ ℃. １ NY/T ４３５６—２０２３ ７ 分析步骤 ７１ 试样制备 试样取可食部分经匀浆机匀浆或者粉碎机粉碎均匀后,储存于样品瓶中.所有制备试样于－１８ ℃条件下保存. ７２ 提取 (根据试样性状,称取试样０１g~５０g(精确至０００１g)置于１５０ mL 具塞三角瓶中,加入２５ mL 甲醇 ５１１),置于恒温振荡水浴锅中４５ ℃ 下振荡提取１０ min,取出后转移至５０ mL 容量瓶中,分别用 ５ mL甲醇冲洗具塞三角瓶２次后,转入５０ mL 容量瓶中并用甲醇定容至５０ mL,混匀后过滤膜(５４),测甜菜碱的含量.对照标准工作溶液中甜菜碱的含量进行稀释. ( ７３ 测定 ７３１ 液相色谱参考条件 色谱柱:RxSIL 色谱柱,柱长１５０ mm,内径４６ mm,颗粒度５０μm,或性能相当者; 流动相:乙腈＋水＝８０＋２０(体积比); 进样量:１０ L; d) 柱温:３０ ℃; e) 检测波长:１９６nm. ７３２ 标准工作曲线 标准工作溶液(５３２)注入高效液相色谱仪按照７３１ 的规定测定,以甜菜碱质量浓度为