2023年机能学实验报告.docxVIP

试验一、小肠平滑肌生理特性的观测与分析 一、试验目的—— 1. 观测温度、乙酰胆碱、肾上腺素等药物对离体家兔小肠平滑肌的作用； 2. 观测消化道平滑肌的一般生理特性及分析理化环境变化对其舒缩活动的影响。 二、试验原理　 消化道平滑肌和骨骼肌、心肌同样，也具有兴奋性、传导性和收缩性，有些也具有自律性。相比之下消化道平滑肌的兴奋性低，收缩慢，伸展性大，具有紧张性收缩， 对化学物质、温度变化及牵张刺激较敏感等特性。小肠离体后，置于合适的溶液中，观测其收缩活动及环境变化的影响，观测分析上述生理特性。 三、试验材料—— 1、试验动物：家兔 2、 器械、药物：电热恒温水浴锅、浴槽、张力换能器(量程为25g如下)、BL-410生物记录系统、L型通气管、道氏袋、注射器、培养皿、温度计、烧杯、螺 丝夹、三维调整器、台氏液、0.01%去甲肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、1mol/L NaOH溶液、lmol/L HCl溶液、2%CaCl2溶液。 四、试验措施和环节 1、标本制备流程： ①击昏家兔： 用木槌猛击兔头枕部，使其昏迷。 ②剖开腹腔迅速取出肠管： 立即剖开腹腔，找出胃幽门与十二指肠交界处，迅速取长20~30cm的肠管，先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去，置于供氧台氏液中轻轻漂洗，把肠内容物基本洗净。 ③制作离体肠标本： 将肠管提成数段，每段长2-3cm，两端各系一条线，保留于供氧的38℃左右的台氏液中 2、仪器安装与调试试验安装（如图）： 恒温水浴锅控制加热，恒温工作点定在38℃。将充斥氧气的道氏袋与通气钩相连接，将肠段一端系在通气管钩上，另一端与张力换能器相连。控制通气量，使氧气从通气管前端呈单个而不是成串逸出。 仪 器调试：BL-410系统的使用，选择“试验项目”中的“消化试验”选中“消化道平滑肌生理特性”。有关参数设置的参照值：时间常数t→DC，高频滤波 F→30Hz，显速→4.00s/div，增益→100g。用鼠标左键单击工具条上的“开始”按钮，调整参数至波形幅度、密度合适，待收缩曲线稳定后，单 击记录按钮。 观测项目现象及解释 1．待标本稳定后，记录小肠平滑肌收缩的对照曲线。 2．乙酰胆碱的作用 用滴管吸入0.01%乙酰胆碱向灌流浴槽内滴1~2滴。观测到明显效应后，立即从排水管放出浴槽内含乙酰胆碱的台氏液，加入新鲜温台氏液，由此反复3次，以洗涤或稀释残留的乙酰胆碱，使之到达无效浓度，待小肠运动恢复后进行下一项。 3．肾上腺素的作用 按上述措施将0.01%肾上腺素加入浴槽内1~2滴，观测小肠运动的反应。当效果明显后，立即更换台氏液。 4．氯化钙的作用 加2%CaC12溶液2~3滴入灌流浴槽内，观测其反应，效果明显后迅速冲洗。 5．盐酸的作用 加1~2滴1mol/L HCl溶液入浴槽内，观测其反应。 6．氢氧化钠的作用 在(5)基础上加等容量的1mol/L NaOH溶液入浴槽内，观测其反应。按上述措施更换台氏液，反复冲洗。 7．温度的影响 将浴槽内台氏液放出，注入25℃台氏液，观测平滑肌收缩有何变化，当效应明显后再换入38℃台氏液，持续一段时间后，再换入42℃台氏液，观测收缩活动的变化（亦可根据室温的详细状况选做其中的一项）。 五、注意事项—— 1. 试验过程中必须保证标本的供氧(通气)及浴槽内台氏液的恒温(38℃)，以维持标本活性。 2. 灌流浴槽内的液面高度应保持恒定。 3. 放大器零点调好后不要再移动旋钮，以免影响基线。 4. 上述各药液加入的量系参照数据，效果不明显者可以添加。 5. 每次试验效果明显后立即放掉含药液的台氏液，并冲洗多次，以免平滑肌出现不可逆反应。 6．各项处理必须有处理标识。 六、有关知识 家兔小肠平滑肌以胃幽门与十二指肠交界处的肠管活动最佳，对生物化学原因也较敏感，因此选用用此处肠管作标本。 七、试验讨论： 1、 正常状况下，我们观测到离体小肠平滑肌在台氏液中可以自动地、缓慢地收缩，但其节律性很不规则。小肠平滑肌自律性产生的离子基础尚未完全清晰，目前认为， 它的产生也许与细胞膜上生电性钠泵的活动具有波动性有关，当钠泵的活动临时受克制时，膜便发生去极化；当钠泵活动恢复时，膜的极化加强，膜电位便又回到原 来的水平。 2、在浴槽中加入0.01%乙酰胆碱 （Ach ）2滴（约0.2ml）后，可见离体肠管活动增强，描记曲线出现收缩频率变快，幅度增长。出现上述现象的机理，目前认为与消化道平滑肌细胞产生动作电位的 离子基础是Ca2+的内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结合，使得两类通道开放：一类为电位敏感性Ca2+专用通道，另一类为特异性受体活化Ca2+ 专用通道。前一类通道对Ach敏感，小剂量Ach即引起开放；后一类通道对Ach相对不敏感，只有大剂量Ach才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中 Ca2+增高，进而激活