QB_T 5713-2022CN发酵液中L-谷氨酸的测定 酶电极法.pdf

ICS 67. 180. 20QBCCS X 69中华人民共和国轻工行业标准QB/T5713—2022发酵液中L-谷氨酸的测定酶电极法DeterminationofL-glutamateinfermentationenzymeElectrodemethod2022-04-08发布2022-10-01实施中华人民共和国工业和信息化部发布 QB/T 言本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草，本文件由中国轻工业联合会提出。本文件由全国食品工业标准化技术委员会（SAC/TC64）归口。本文件起草单位：梁山菱花生物科技有限公司、山东省科学院生物研究所、武汉远大弘元股份有限公司、中国生物发醇产业协会、天津科技大学，本文件主要起草人：毕春元、杨玉岭、王晋、张文文、张成林、李建军、杜祎、涡德恩、关丹。本文件为首次发布。I QB/T酵液中L-谷氨酸的测定酶电极法1范围本文件描述了酶电极法测定发酵液中L-谷氨酸的原理、试剂和溶液、仪器和设备、试样制备和分本文件适用于L-谷氮酸发酵生产过程中L-谷氮酸的快速测定。本文件的定量限为0.01g/L。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件，GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义，4原理谷氨酸氧化酶可特异性催化L-容氨酸，生成相应的氧化产物和过氧化氧（HO）。测定时，样品中L-谷氨酸向L-谷氨酸氧化酶醇膜扩散，并与谷氨酸氧化酶层接触发生酶催化反应，催化产物HO2在电极表面产生电流信号的变化，电流信号变化量与样品中L-谷氨酸的浓度在一定范围内成线性相关性，将谷氨酸酶电极与相应的液体试剂、电路、控制软件等组成仪器，从而实现L-谷氮酸的快速、准确测定，H,O,→H*+HO,5试剂和溶液本试验方法中，所用试剂除特殊注明外均为分析纯：水应符合GB/T6682中三级（含三级）以上的规格。- QB/T 571320225.1试剂5.1.1磷酸二氢钠：相对分子质量119.98。5.1.2磷酸氯二销：相对分子质量141.96。5.2试剂配制缓冲溶液；用分析天平分别称取过20目分析筛的磷酸氢二钠0.85g，过20目分析筛的磷酸二氢钠0.19g，溶于100mL水中，备用。5.3标准品L-谷氨酸钠。5.4标准溶液配置L-谷氨酸标准溶液：将L-谷氨酸钠放入烘干箱，104烘干4h，取出放干燥器冷却至室温，用电子天平准确称取0.1285g烘干后的L-谷氨酸钠，放入100mL烧杯中，加入少量蒸慎水使之溶解，转移至100mL容量瓶中，用蒸馅水稀释至刻度，摇匀。密封保存。5.5L-谷氨酸氧化酶酶膜谷氨酸氧化酶0.1U（活力单位）；0℃~4℃C保存。6仅器和设备6.1分子筛：20目。6. 2烘干箱。6. 3分析天平：感量为0.01g.6. 4电子天平：感量为0.0001g6.5酶电极谷氨酸分析仪：直接读数式，测量相对误差小于2%。6.6其他实验室常用仪器。7试液制备7. 1用干燥洁净容器取待测落液1mL左右，转移至1.5mL高心管内，待测。7. 2当待测溶液中L-谷氮酸含量大于1.00g/L时，应按相应比例对待测液进行稀释后再测定。8分析步票8.1校正仪器8.1.1室温下开机，启动仪器，首先用L-谷氨酸标准落液（5.4）、缓冲落液（5.2）进行仪器校正（半自动仪器手工校正，全自动仪器自动校正），使仪器达到可测样状态。8. 1.2当酶电极响应信号小于200时，应更换新的L-谷氨酸氧化醇醇膜。 QB/T 571320228. 2测定样品8. 2. ↑半自动仪器用试液（7）冲洗微量进样器，至少两次。准确吸取试渡（7）25μL，用滤纸擦干针尖外部后注入进样口，仪器显示测定结束后读取显示值。8.2.2全自动仪器按仪器本身操作程序进行测定。8. 3分析结果的表述样品中L-谷氮酸的含量以X表示，按公式（1）计算：X=nR.(1)式中;样品中L-谷氨酸的含量，单位为克每升（g/L）：试液的稀释倍数；R- 仪器测定值，单位为克每升（g/L），8.4精密度使用该方法检测L-谷氨酸，同一样品的两次测定值之差，不应超过两次测定算术平均值的2%， QB/华人民共和国轻工行业标准发酵液中L-谷氨酸的测定酶电极法QB/T国轻工业出版社出版发行地址：北京东长安街6号邮政编码：100740发行电话：(01038网址; Email: 轻工业标准化编辑出版委员会编辑地址：北京西城区月坛北小街6号院邮政编码：1