链球菌肠球菌PPT课件.pptx

目的要求：;步骤与方法;;;;;;将菌株接种于血琼脂平板上，35℃孵育18-24h后观察菌落，肠球菌在血琼脂平板上呈灰白色、不透明、表面光滑的小菌落，菌落周围可出现α溶血环，也可无溶血环。 pneumoniae 方法：挑取菌落2-3个转种于含有提取酶的试管中，使其成为乳化均匀的菌悬液，置37℃水浴15min。 方法：将待检菌接种65g/L NaCl血清肉汤中，35℃孵育18-24h。 原理：Lancefield根据链球菌细胞壁中多糖抗原的不同，将链球菌分为20多个群，对人类治病的多数为A群，偶见B、C、D、F、G群。 在两种细菌划线的交接处出现箭头型透明溶血区为阳性，否则为阴性，此试验为B群链球菌与其他链球菌鉴别的重要试验，无乳链球菌为阳性，其他为阴性。 培养特性：培养48h后，菌落有自溶现象，菌落的中心会出现凹陷，像“肚脐”称脐状凹陷。 肺炎链球菌革兰染色有荚膜 结果判断：在2-10min内发生胶乳凝集，为阳性。 血平板呈灰白色表面光滑小菌落，不同 结果判断：出现凝集为阳性、不凝集为阴性。 （2）胆汁-七叶苷试验： 原理：A群化脓性链球菌对杆菌肽几乎100%敏感，而其他链球菌对杆菌肽通常耐药。 方法：取待检菌纯培养物接种于马尿酸钠培养基， 35℃培养48h，3000r/min离心30min,吸取上清液0. 在反应板个空内分别滴加稀释血清、阳性和阴性对照血清1滴（50ul），再于各孔内滴加1滴溶血素“O”溶液，轻摇1min混匀，最后在各孔内分别滴加1滴ASO胶乳试剂，轻摇3min后观察结果。 8ml于另一试管，加入FeCl30. 原理：A群化脓性链球菌对杆菌肽几乎100%敏感，而其他链球菌对杆菌肽通常耐药。 初次分离需提供5%-10%的CO2。 掌握链球菌及链球菌的菌落特点、菌体形态及染色性。 方法：将待检菌接种65g/L NaCl血清肉汤中，35℃孵育18-24h。;;;;;B、试管法：将甲型链球菌和肺炎链球菌血清肉汤培养液1ml分别加入2支试管，再于各管中加入去氧胆酸钠溶液0.1ml，摇匀后置于37℃水浴30min后观察结果。 结果判断：平板法若菌落消失为阳性，不消失为阴性，试管法若液体由浑浊变透明为阳性，不透明为阴性，此试验是鉴别甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌的重要试验，后者阳性。;;A群(化脓性)链球菌;;A群(化脓性)链球菌;;??握链球菌属及肠球菌属的分离培养与鉴定方法。 方法：将待检菌接种65g/L NaCl血清肉汤中，35℃孵育18-24h。 在两种细菌划线的交接处出现箭头型透明溶血区为阳性，否则为阴性，此试验为B群链球菌与其他链球菌鉴别的重要试验，无乳链球菌为阳性，其他为阴性。 原理：B群链球菌有马尿酸水解酶，可水解马尿酸为苯甲酸和甘氨酸，苯甲酸可与FeCl3，结合形成苯甲酸铁沉淀。 方法：将待检菌接种65g/L NaCl血清肉汤中，35℃孵育18-24h。 将肺炎链球菌继续孵育2-3天看菌落中心有无凹陷呈“脐状”。 在反应板个空内分别滴加稀释血清、阳性和阴性对照血清1滴（50ul），再于各孔内滴加1滴溶血素“O”溶液，轻摇1min混匀，最后在各孔内分别滴加1滴ASO胶乳试剂，轻摇3min后观察结果。 原理：培养基的胆汁对某些细菌有抑制作用，只有既能在胆汁中生长，又能水解七叶苷的细菌才能表现出对七叶苷的水解活性。 结果判断：出现凝集为阳性、不凝集为阴性。 pneumoniae 同时设阳性对照和阴性对照。 pneumoniae 掌握链球菌属及肠球菌属的分离培养与鉴定方法。 结果判断：出现凝集为阳性、不凝集为阴性。 原理：肠球菌有很强的耐盐能力，能在65g/L NaCl血清肉汤培养基中生长，而链球菌的耐盐能力较弱，在此培养基中不能生长。 初次分离需提供5%-10%的CO2。 在两种细菌划线的交接处出现箭头型透明溶血区为阳性，否则为阴性，此试验为B群链球菌与其他链球菌鉴别的重要试验，无乳链球菌为阳性，其他为阴性。 04U/片）贴于平板上，35℃孵育18-24h观察。 无芽胞，无鞭毛，透明质酸的荚膜。 方法：挑取被检菌落，密涂于血琼脂平板上，将杆菌肽纸片（0. 掌握链球菌及链球菌的菌落特点、菌体形态及染色性。;B群无乳链球菌;;;;;;;;;原理：A群化脓性链球菌对杆菌肽几乎100%敏感，而其他链球菌对杆菌肽通常耐药。 原理：抗链球菌溶血素“O”（ASO）高滴度的病人血清被适量的溶血素“O”中和后，失去了正常水平量的抗体，多余抗“O”抗体与ASO胶乳试剂反应，出现清晰、均匀的凝集颗粒。 原理：A群化脓性链球菌对杆菌肽几乎100%敏感，而其他链球菌对杆菌肽通常耐药。 结果判断：出现凝集为阳性、不凝集为阴性。 无芽胞，无鞭毛，透明质酸的荚膜。 待检菌与哪群致敏胶乳凝集就表明该菌为相应血清群的链球菌。 原理