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- 2023-08-02 发布于江苏
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DNA的合成及重组 DNA Biosynthesis and Recombination第十六章
DNA生物合成DNA复制(DNA指导的DNA合成)逆转录 (逆转录病毒RNA指导的DNA合成)校正复制中可能出现的错误,并修复受到损伤的DNA细胞中酶促修复系统自然界DNA重组和基因转移的基本方式
基因组复制的主要特点The General features of Genome Replication 第一节
一、基因组是细胞或病毒全部遗传信息的总和 含有一种生物的一整套遗传信息的遗传物质,称为基因组(genome)。在真核生物体中,基因组是指一套完整单倍体DNA(染色体DNA)和线粒体DNA的全部序列,既包括编码序列,也包括非编码序列。
二、基因组DNA复制具备一些共同特征(一)基因组DNA都具有固定的复制起始点(二)复制过程中形成复制泡和复制叉(三)复制的基本单位称为复制子 (四)半保留复制方式保证遗传信息的忠实传递 (五)半不连续复制克服了DNA空间结构对DNA 新链合 成的制约 (六)复制起点由多个短重复序列组成 (七)DNA复制必须有引物
复制起点(origin):指DNA复制所必需的一段特殊的DNA序列。 (一)基因组DNA都具有固定的复制起始点
双螺旋DNA复制时,复制区生长点的结构呈Y形或叉形,称之为复制叉。(二)复制过程中形成复制泡和复制叉目 录
从一个DNA复制起点起始的DNA复制区域,它是一个独立复制单位,包括复制起点和终点。 复制子(replicon)(三)复制的基本单位称为复制子
(四)半保留复制方式保证遗传信息的忠实传递(1)全保留式(conservative),即恢复原来的DNA双螺旋,并产生一个新的子代DNA双螺旋;(2)半保留式(semiconservative),即新老搭配,由一条新合成的DNA链和一条复制模板链配对产生子代双螺旋DNA;(3)散布式(dispersive),即复制模板链被分成许多小片段,散布于子代DNA中。两条新合成的DNA链和两条原来的复制模板链之间的结合方式可能性:
密度梯度实验 ——实验结果支持半保留复制方式含重氮-DNA的细菌培养于普通培养液 第一代继续培养于普通培养液 第二代梯度离心结果
前导链(leading strand): DNA复制时,一条链的合成方向和复制叉前进方向相同,可以连续复制合成的新链。后随链(lagging strand):另一条链的合成方向与复制叉前进方向相反,不能连续复制,只能分成若干小片段分别合成,然后连接起来形成新链。后随链中的小片段称为冈崎片段(Okazaki fragments)。(五)半不连续复制克服了DNA空间结构 对DNA新链合成的制约前导链连续复制而后随链不连续复制,即DNA半不连续复制。
复制起点的一般特征:① 由多个独特的短重复序列组成。② 短重复序列被多亚基的复制起始因子所识别并结合。③ 一般富含AT,利于双螺旋DNA解旋,以产生单链DNA复制模板。(六)复制起点由多个短重复序列组成
E.coli 复制起始点 oriC GATTNTTTATTT ··· GATCTNTTNTATT ··· GATCTCTTATTAG ··· 1 13 17 29 32 44 ···TGTGGATTA-‖-TTATACACA-‖-TTTGGATAA-‖-TTATCCACA58 66 166 174 201 209 237 245 同向重复序列 反向重复序列5?3?5?3?
酵母复制起点为自主复制序列(autonomously replicating sequences,ARS): 酵母染色体含有多个复制起点。元件A(富含A/T的共有序列):结合一个特异的蛋白质复合物──复制起点识别复合物(ORC)。 3个序列(B1、B2和B3)可以增加复制起点的效率,其中B2的9个碱基与上述ARS共有序列相同。酵母复制起始点
DNA聚合酶不能从游离的核苷酸开始合成DNA链,必须由引物(primer)提供自由的3?-OH末端,通过加入核苷酸使之不断延伸。所有细胞和多数病毒的DNA复制,
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