DB37T 1249-2009化妆品中氯霉素的测定 液相色谱-串联质谱法.pdf

1CS 67.020X 04DB37山东國省地方标准DB37/T妆品中氯霉素的测定液相色谱一串联质谱法Determination of chloramphenicol in cosmetics by liquidchromatography-tandom mass spectrometry2009-05-31发布2009-07-01实施山东省质量技术监督局发布 DB37/T标准附录A、B为资料性附录。本标准由山东省质量技术监督局提出。本标准由山东食品标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省产品质量监督检验研究院。本标准主要起草人：刘艳明、张卉、王骏、周莉莉、张娟、霍艳敏。 DB37/T1249—2009化妆品中氯素的测定液相色谱一串联质谱法1范围本标准规定了液相色谱一串联质谱测定化妆品中氯霉素的方法。本标准适用于化妆品中氯霉素的测定。本标准方法检出限为α.01g/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的弓用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验氢用水规格和试验方法3原理样品中的氯霉素用甲醇一盐酸溶液提取，经液相色谱分离后，用带有电喷雾离子源的三重四极杆质谱检测器在负离子模式下检测，外标法定量。4试剂和材料4.1除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.2乙腈（色谱纯）。4.3甲醇（色谱纯)。4.4浓盐酸（优级纯）。4.50.1mol/mL盐酸溶液：取优级纯浓盐酸（4.3）8.3mL加水至1L。4.6氯霉素标准品：纯度95%。4.7氯霉素标准储备溶液：称取100mg氧霉素标样于100mL棕色容量瓶中，用甲醇（4.2）落解并定容至刻度，掘匀。此溶液每毫升含氧霉素100ug。4℃避光储存，有效期2周。4.8氯霉素标准工作溶液：在室温条件下，将氯霉素标准储备液用甲醇稀释成1.0ng/、10.0ng/、50.0ng/L、100.0ng/nL、200.0ng/nL的系列标准溶液。4.9微孔滤膜：有机相，孔径0.2um。5仪器和设备5.1高效液相色谱一质谱联用仪：具电喷雾离子源和三重四极杆质量分析器。5.2分析天平：感量0.1mg和0.01g。5.3涡旋混合器。5.4低温高速离心机：制冷温度4℃，转速至少8000r/in。5.5冰箱：制冷温度至少-10℃。6分析步疆6.1试样的处理6.1.1固体试样称取Ig（精确至0.01g）粉碎（研磨）后的样品于10mL容量瓶中，加入甲醇（4.3）+盐酸（4.5）1 DB37/T1249—2009=1+1（体积比）的混合溶液定容至刻度，匀，超声波提取20min，转移至30mL离心管中，于4℃、8000r/in离心10in。对脂肪含量较高的样品，置于-10C冰箱中放置1h，使脂肪凝聚。然后，取清液微孔滤膜（4,9）过滤后进样测定。对氯霉素浓度较高的样品，适当稀释后进样。6.1.2液体试样称取g（精确至α01g）试样于10L容量瓶中，加入甲醇（4.3）+盐酸（4.5）=1+1（体积比）的混合溶液定容至刻度，摇匀，超声波提取20min，转移至30L离心管中。对脂肪含量较高的样品，置于-10℃冰箱中放置1h，使脂肪凝聚。然后，取清液微孔滤膜（4.9）过滤后进样测定。对氯霉素浓度较高的样品，适当稀释后进样。6.2仪器参考条件6.21液相色谱操作条件a)色谱柱：C18柱，100×2.1mm(i,d)，1.7μl;b) 流速: α. 4 mlL/min;c）柱温：40℃；D进样体积：10μL：e）流动相：乙睛（A)、水（B);f）流动相梯度见表1。表1流动相梯度表时间(min)A (%)B (%)梯度邮线0., 00208039010线性3. 011000线性5.001000线性5,012080线性72080线性6.22质谱操作条件：参见附录A。6.3测定6.3.1定性测定将空白添加标准落液和待测样品在附录A中条件下进行测定，着样品和基质标准落液质量鱼增图中氯霉素的保留时间一致，且定性离子对的相对丰度偏差符合表2的规定，则可判定样品中存在氯霉素残留。表2定性测定是相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度50%20%至50%10%至20%≤10%允许的相对偏差±20%±25%±30%±50%6.3.2定量测定将标准工作落液（4.8）按照浓度由低到高的顺字进样测定，以定量离子峰面积一浓度作图，得到标准曲线回归方程。试样溶液进样后，用上述曲线采用外标法定量。待测样波中氯霉素的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样分