SC_T 7016.13-2019CN鱼类细胞系 第13部分：鲫细胞系（CAR）.pdf

ICS 65.150B 50Sc中华人民共和国水产行业标准SC/T 7016.132019鱼类细胞系第13部分：鲫细胞系（CAR）Fish cell lines-—Part 13:Carassius auratus cell line(CAR)2019-08-01发布2019-11-01实施中华人民共和国农业农村部发布 SC/T 7016.132019中华人民共和国水产行业标准鱼类细胞系第13部分：解编胞系(CAR)SC/T 7016. 13—2019***中国农业出版社出版（北京市朝阳区麦子店街18号楼）（邮政编码：100125网址: www. ccsp. com. cn)北京印剧一厂印刷新华书店北京发行质发行各地新华书店经站*开本 880mmX1230mm1/15印张0.75字数15千字2019年10月第1版2019年10月北京第1次印刷书号：16109· 4913定价：18.00元版权专有侵权必究SC/T 7016.13-2019举报电话：（010 SC/T 7016. 13—2019前言SC/T7016《鱼类细胞系》为分部分标准，拟分为如下部分；第1部分：胖头缴肌肉细胞系（FHM；第2部分，草鱼肾细胞系(CIK)；第3部分：草鱼卵巢细胞系(CO)；第4部分：虹尊性腺细胞系(RTG-2)。第5部分：鲤上皮瘤细胆系（EPC)；第6部分：大矫大麻哈鱼胚胎细胞系(CHSE)；第7部分：棕鲤细胞系（BB)；第8部分：斑点叉尾细卵巢细胞系(CCO)；第9部分：蓝鳃太阳鱼细胞系(BF-2)；第10部分：狗鱼性腺细胞系(PG)；第11部分：虹鳞肝细胞系(R1)；第12部分：鲤白血球细胞系(CLC)；第13部分：解细胆系（CAR)；第14部分：锦吻晕胚细胞系(KS)；本部分为SC/T7016的第13部分。本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草，请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由农业农村部渔业渔政管理局提出。本部分由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC156)归口。本部分起草单位：北京市水产技术推广站、中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所。本部分主要起草人：徐立蒲、景宏丽、王妹、曹欢、潘勇、张文、王静波、王小亮、那立海、江育林。I SC/T 7016. 13—2019鱼类细胞系第13部分：鲫细胞系(CAR)范围本部分规定了卿细胞系的术语和定义，缩略语，试剂与材料，器材与设备，细胞形态、大小与特性，细胞培养条件，细脑传代与保存，质量检查。本部分适用于CAR的培养、使用和保藏。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1解细胞系carassius auratus cell line,简称 CAR来源于ATCC(AmericanTypeCultureCollection)，编号CCL-71，该细胞系于1964年由Clem建立。4缩略语下列缩略语适用于本文件。ADIV;大虹彩病毒(andrias davidianus iridovirus)BIV：玻勒虹彩病毒(bohlevirus）EHNV：流行性造血器官坏死病毒(epizootichaematopoietic necrosisvirus)GCRV草鱼呼肠蕉病毒(grass carpreovirus)5试剂与材科5.1 水应符合GB/T6682中一级水的规定。5.2细胞培养液配制方法参见附录A或使用商品化试剂。6器材与设备主要包括：a)生化培养箱：b)超净工作台；c)倒置显微镜；d)液氮罐；e)细胞培养瓶、移液管等耗材。7细胞形态、大小与特性7. 1形态 SC/T 7016. 13—2019上皮样细胞，细胞量纤维状(参见附录B)。7. 22大小经细胞实时分析系统测定细胞悬浮后的平均直径约14.0μm(参见附录C)。7.3特性7.3.1生长特性贴壁生长，8h内细胞贴壁并生长；18h后能基本长满单层细胞。7.3.2对部分水生动物病毒的敏感性对GCRV、EHNV、ADIV和BIV等病毒敏感（参见附录B)8细胞培养条件细胞置生化培养箱内，在15℃～25℃下培养，最适生长温度为25℃。6细胞传代与保存9.1传代9.1.1吸弃置超净工作台内，无菌环境下吸弃长满单层CAR细胞培养瓶中的旧培养液。9.1.2消化和分散细胞培养瓶一侧加人细胞消化减，般在25cm细胞培养瓶中加入1mL~2mL，或按照细胞培养瓶培养面每平方厘米加人0.1ml，贴壁长满的CAR消化时间一般为2min～3min，细膜开始量雾