SC_T 2105-2021CN红毛菜.pdf

ICS 65.150CCS B 51SC中华人民共和国水产行业标准SC/T 2105—2021红毛菜Bangiafuscopurpurea2021-11-09发布2022-05-01实施中华人民共和国农业农村部发布 SC/T 2105—2021附录B(规范性）红毛菜质体rbcL基因序列分析方法B.1总DNA提取取约0.1g(湿重)红毛菜藻体，用蒸偏水洗涤3遍，在液氮中研成粉末。将粉末转至1.5mL离心管中,加人 1. 5 mL CTAB裂解缓冲液(100 mmol/L Tris-HCl,20 mmol/L EDTA,1. 4 mol/L NaCI,2. 0%(W/V）CTAB,2%基乙醇，pH=8.0)，在65℃保温1h，其间播匀几次。用等体积的氧仿：异戊醇(24：1)抽提2次，将水相转移至1.5mL离心管中，加人1/10体积的RNA酶，37℃保温1h，再用氧仿：异戊醇(24：1)抽提1次，异丙醇沉淀回收DNA。DNA最后溶于100μL的TE缓冲液中，置于20℃冰箱保存备用。B.2引物序列rbcL F;5-AATGGAAGGGCGTAAA-3;rbcL R;5-TCAGTTTGGTGGTGG-3′。B. 3PCR扩增PCR反应体系：2.5μL10XPCR缓冲液,1UTaqDNA聚合酶，200μmol/LdNTP,0.2μmol/L引物，10ng模板DNA，最后添加无菌ddH;O至.总体积25μLPCR扩增程序；94C预变性3min;94C变性45s，45C退火45s，72℃延伸1min，循环35次；最后72C延伸2min，PCR产物经琼脂糖电泳、纯化后进行克隆、测序。B.4遗传距离分析利用Kimura双参数模型（Kimura2-parameter，K2P)计算样品间两两遗传距离。7 SC/T考文献[1]GB21046—2007条斑紫菜 2105-2021SC/T中华人民共和国水产行业标准红毛菜SC/T 2105—2021中国农业出版社出版（北京市朝阳区麦子店街18号楼）（邮政编码：100125网址; wwr. ccsp com- cn)化学工业出版社印剧厂印别新华书店北京发行所发行各地新华书店经销*开本 880mmX1230mm 1/16印张 1字数20千字2022年2月第1版2022年2月北京第1次印刷书号; 16109 · 8822定价：36.00元版权专有慢权必究SC/T2105-2021举报电话：（010 SC/T言本文件按照GB/T1.1—2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由农业农村部渔业渔政管理局提出。本文件由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会(SAC/TC156/SC2)归口。本文件起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所。本文件主要起草人：汪文俊、张岩、鲁晓萍、马夷、梁洲瑞、刘福利、孙修涛。- SC/T毛菜1范围本文件给出了红毛菜[Bangiafiscopurpurea（Dillwyn）Lyngbye，1819]的术语和定义、学名与分类、主要形态构造特征、繁殖特性、细胞遗传学特性、分子遗传学特性、检测方法与判定规则。本文件适用于红毛菜的种质检测与鉴定。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1藻体thallus由壳孢子或单孢子萌发形成的配子体。3. 2丝状体f conchocelis由果孢子萌发形成的孢子体。在栽培过程中属种苗阶段。[来源；GB21046—2007,2.2，有修改］3. 3果胞carpogonium雌配子体成熟分化形成的生殖细胞。3. 4果孢子zygotospore藻体营养细胞转化形成果胞与精子囊器，成熟后两性细胞结合形成合子，由合子分裂形成的孢子。[来源；GB21046—2007,2.3，有修改］3. 5壳袍子conchospore丝状体营养藻丝发育形成孢子囊枝，由孢子衰成熟分裂形成的孢子。[来源;GB 21046—2007,2.4,有修改]3. 6单孢子archeospore为无性生殖孢子，由藻体营养细胞形成单孢子囊，一个孢子囊产生一个单孢子，萌发生成藻体。[来源：GB21046—2007，2.5，有修改］3. 7质体plastid为藻体和丝状体中营光合作用的细胞器，含有叶绿素a、类胡萝下素、藻胆蛋白等光合色素。4学名与分类4.1学名红毛 [Bangia fiuscoptrpurea (Dillwyn) Lyngbye,1819], SC/T 2105—20214.2分类地位红藻门(Rhodophyta）红藻纲（Rh