DB64 727_2011马铃薯脱毒基础苗培育技术标准.pdf

ICS 65. 020. 20B05DB64宁夏回族自治区地方标准DB 64/T 7272011马铃薯脱毒基础苗培育技术标准2011-12-18发施宁夏回族自治区质量技术监督局发布 DB64/ T 7272011前言本标准的编写格式符合GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》的要求。本标准由北方民族大学提出。本标准由宁夏回族自治区农教厅归口。本标准由北方民族大学起草。本标准主要起草人：曹君迈、陈彦云、杨桂琴、郭荣、陈建荣、陈彩芳、冯佩、马登华、祁金涛。 DB64/ T 7272011马铃薯脱毒基础苗培育技术标准1范围本标准规定了马铃薯脱毒基础苗培育技术标准的术语和定义、培养的实酸室条件、生产技术方法、脱声基础苗质量要求。本标准适用于马铃著脱毒基础苗培育。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB18133马铃薯脱毒种薯生产技术规程DB64/T492-2007马铃薯种薯生产技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1脱毒苗应用茎尖分生组织做外植体通过植物组织培养技术获得的、经检测确认不带马铃著卷叶病毒-PLRY、马铃等Y病毒-PVY、马铃薯X病毒-PVX、马铃薯S病毒-PVS、马铃薯M病毒-PVM、马铃薯A病毒-PVA和马铃薯纺循块基类病毒-PSTVd的再生试管苗。3. 2外植体用来进行无菌培养的植物器官、组织、细胞、原生质体等高体材料或用于继代培养的组织培养物。3. 3脱毒基础苗用脱毒苗作为基础材料，在人工培养基上培养出的脱毒苗。4培养实验室条件4.1实验室建造要求及布局. DB64/ T 7272011实验室位置应坐北面南偏东5，南面墙体采用落地效璃窗，准备室、接种室和培养室用玻璃隔开，培养室北面墙体张挂反光幕，地面铺反光性好的瓷砖。实验室应具各通风、宽、明亮、防滑的准备室，干燥、清洁、封闭性好的接种室和培养室。准备室与接种室相邻，接种室和培养室设有缓冲区，Z实验器具选用马铃薯脱毒基础苗液体培养组培瓶和马铃薯脱毒基础苗培养架，4.3环境条件要求4.3.1光适宜光强29001ux~46001ux：光周期12h光/12h暗：光质在马铃薯茎秆呈黄绿色时用白光或淡红光，马铃薯茎秆呈红绿色时用白光。4.3.2温度适宜温度23℃±2℃。4.3.3环境湿度适宜湿度30%~60%。4.3.4pH值适宜pH值5.6~6.0。4.3.5培养基采用MS培养基，不添加任何激素。5生产技术方法5.1培养基母液的配制按表1要求配制培养基母液。表1KS培养基母液的配制标准用量扩大倍数称取量母液定容体积1升培养基吸取量母液编化合物名称(mg/L)(倍)(ng)(al )(ml )KNO,1900100190000NHNO,16901001690005种益分充母液1KHPO落案后混合10 37010037000定落至1000MgS0, 7H0CaC1s 2H/044010044000母液2MnSO, 4H/Q22. 3100223010 DB64/ T 7272011表1（缕）、标准用量扩大倍数称取量母液定容体积1升培养基吸取量母液编号化合物名称(ng/L)(倍)(ng)(ml)(ml)ZnS0., 7B,08. 6100860H.B0,6.盐分别充KI0, 8310083母减2分落解后混合10Na,Ios 2H/00. 2510025定落至1000m1CuS0 5H,00. 0251002. 5CoC1s 6H,00. 0251002. 5Na,-EDTA37. 310037302种盐分别充母液3分落解后混合10FeS0., 7H,027.落至1000m1竹氨有机物分益酸酸素VB0. 110010 母液4刷溶解后再定10盐酸够醇VB0. 510050落至1000n1烟酸 0. 5 10050 5. 2培养基母液的保存配制好的母液分别贴上标签，注明母液名称、扩大倍数或浓度、日期，送于冰箱4℃保存备用。母液出现霉变或沉淀时，不再使用。5.3培养基配制按每升培养基分别量取表1中的各种母液，放入烧杯中备用：称取卡控胶5g/L、食用白糖25g/L，放入不锈钢锅中，加入所需培养基体积量的2/3的水，煮滞沸至清激透明：将烧杯中的混合母液加入不锈钢锅中定容：用精密pH试纸或pH测定仪测pH值后，用1molHC1或1no1Na0R将培养基pH值调至5.6~6.0.5. 4培养基灭菌将配好的固体培养基，每瓶装30ml.～40nL，封紧瓶口，放入高压灭菌筐内，121℃灭菌，压强为0.105M