菠萝蜜组培育苗技术规程.pdfVIP

菠萝蜜组培育苗技术规程 1 范围 本文件规定了菠萝蜜外植体选择和灭菌、初代诱导、继代增殖、生根培养、炼苗和移栽等技术要求。 本文件适用于菠萝蜜的组培育苗生产技术。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本 （包括所有的修改单）适用于本 文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 1/2MS培养基 所有元素含量减为MS培养基的1/2的培养基。 4 外植体选择和灭菌 从生长正常且无病的菠萝蜜植株的茎干上选取健壮徒长的饱满嫩芽，在室内修剪成不带叶片的茎段 (长4~5cm，带3~4节)，并用自来水冲洗干净，然后用加有数滴吐温80的无菌水溶液约浸泡5min，接着用 75%的酒精消毒20s，再用0.1%的氯化汞水溶液浸泡灭菌约10min，轻微摇动，最后用无菌水冲洗茎段6 次。将嫩茎段在超净工作台上横切成1.0~1.5cm的小段( 带有1~2节的茎段)，按照原来的极性接种到 MS+6-BA1.5mg/L+KT 0.5mg/L培养基上，3d观察1次，清除污染材料，15d后把无菌材料转接到初代诱 导培养基。 5 初代诱导 将无菌材料接于腋芽诱导培养基(见表1)培养。 6 继代增殖 初代诱导约40d后，将腋芽丛生芽切割成单芽，接种于继代培养基(见表1)培养。 7 生根培养 继代培养约40d后，将丛生芽切割成单芽，接种于生根培养基(见表1)培养。 8 炼苗 生根培养40d后的再生苗置于室内窗户边自然光下炼苗5d，然后移置育苗大棚炼苗5d，期间逐渐松 开瓶盖，使再生苗逐渐适应外界环境。 9 移栽 经过炼苗，从组培瓶取出再生苗，洗净根部的培养基，移栽到泥炭土、蛭石、红土 （2：1：1，v/v/v） 组成的混合基质中，用800倍多菌灵夜浇透基质，用透光率40%的遮阳网遮光3d后，再用透光率60%的 遮阳网遮光5d 1 表1 菠萝蜜组培培养基 名称 配方 诱导培养基 MS+6-BA2mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L+AC0.01%+琼脂6g/L，PH 5.8 MS+6-BA2mg/L++NAA0.2mg/L+ 30g/L+ 6g/L PH 5.8 继代培养基 蔗糖 琼脂 ， 1/2MS+IBA0.2mg/L++NAA0.2mg/L+ 30g/L+ 6g/L PH 5.8 生根培养基 蔗糖 琼脂 ， 2