SN 1483.1-2004高粱瘿蚊检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1483.1—2004高梁瘘蚊检疫鉴定方法Methods for quarantine and identification of sorghum midge(Contarinia sorghicola Coquillett. )2005-04-01实施2004-11-17 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准高梁瘘蚊检疫鉴定方法SN/T 1483. 1—2004*中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 电话：6852394668517548中国标推出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本880×12301/16 印张 0.5字数 ９千字2005年2月第一版2005年2月第一次印刷* SN/T 1483.12004前言本标准的附录 A 为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国重庆出人境检验检疫局。本标准主要起草人：江兴培、吴德荣、宋定明、陈异林、张斌。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1483.12004高梁瘦蚊检疫鉴定方法1范围本标准规定了高粱瘦蚊 Contarinia sorghicola Coquillett 检疫和鉴定方法。本标推适用于高梁瘦蚊的检疫和鉴定。2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2. 1体长body length通常以翅基的弓脉至翅顶的长度表示瘦蚊成虫体长。2. 2围蛹 puparia高梁瘘蚊的蛹包裹在其最后一龄幼虫脱皮形成的茧状结构中，又称伪茧。2.3翅顶wing apex瘦蚊成虫翅的外缘离翅基最远端（参见附录A图A.5）。2.4端爪 apical claw瘦蚊雄成虫外生殖器抱器端节端部的梳状结构。2.5二结双环型 binode and bifilar瘦蚊雄虫触角鞭节中部和端部缢缩为二结状，各结具一轮环丝（参见附录A图A.2)。3原理高梁瘦蚊隶属双翅目（Diptera)瘦蚊科（Cecidomyiidae)康瘦蚊属（Contarinia），是我国规定的二类检疫性有害生物，主要危害高梁属植物如高梁、甜高梁、帚高粱、假高粱、约翰生草、苏丹草等。成虫产卵于正在开花抽穗的寄主植物内颖和颖壳内。幼虫吸种子幼胚汁液，造成粒、秕粒。幼虫在寄主植物小穗颖壳内作二薄茧越冬，可休眠3年之久。此虫主要以幼虫休眠体随寄主植物种子（包括高梁类粮食）、带穗头的寄主植物远距离传播。高梁瘦蚊成虫形态特征与其近缘种不同，是分类鉴定的形态学基础。4仪器及试剂4.1生物显微镜、体视显微镜、干燥箱。4.2解剖针、镊子、0号毛笔、标签、白瓷盘、培养血、烧杯、酒精灯、载玻片、盖玻片、吸管、医用纱布、胶圈、养虫瓶。4.380%乙醇溶液、95%乙醇溶液、无水乙醇、10%氢氧化钾溶液、冰乙酸、二甲苯、苯酚、丁香油、加拿大树胶。1 SN/T 1483.1—20045检疫方法5.1肉眼检查解剖来自疫区的高梁属植物种子、高梁类粮食、饲料高粱样品，检查有无休眠幼虫。5.2X光检查在X光下透视，受高梁瘦蚊危害的高梁籽粒图像模糊不清，健康高梁籽粒图像清晰。*5.3淘水法检查用水浸溃高粱类粮食、种子，漂浮出带有休眠幼虫的高粱籽粒。5.4培养检查口岸截获的高粱瘦蚊标本一般为老熟幼虫或蛹。将老熟幼虫或蛹放人养虫瓶内，用滤纸保湿。置于25℃～30℃的条件下即可饲养出成虫。成虫羽化后，须用0号毛笔取80%乙醇溶液，轻轻“粘住”成虫，移人80%乙醇溶液中保存,即可获得完整的高梁瘦蚊成虫标本。6玻片标本制备6.1从80%乙醇保存液中的成虫标本上取下一翅置于显微载玻片上，滴一滴加拿大树胶，封片即成翅脉标本。6.2用10%氢氧化钾溶液浸渍标本，或短时加热（100℃下处理2min～5min），或长时冷处理（在80%乙醇溶液里保存6个月以上的标本要浸渍12h以上）。处理过程中观察到标本软化而且部分透明时即停止。6.3将标本轻轻移人培养血中，用微针轻轻挤压腹腔内容物,若觉仍然坚硬，应继续浸溃一会。6.4将标本转人蒸馏水中 5 min～10 min,加几滴冰乙酸中和剩余的碱性。6.5将标本移人 95%乙醇溶液5 min,并轻轻挤压除去残留的水分。6.6转人无水乙醇彻底脱水。6.7转人苯酚和二甲苯混和液(份苯酚，三份二甲苯)透明，透明过程应在5 min内完成，任何不透明结构的存在都表明：浸渍时间不够或脱水不彻底或两者兼而有之。6.8转人无水乙醇中清洗，然后移人丁香油中最后透明和解剖。把成虫解剖成头、胸（具足)和腹三段。整姿时，头正面朝上，触角披向两边；腹部背面朝上，对称地展示雄性外生殖器和雌虫产卵管；胸部侧面向上，使足和剩下的另一翅展示出来。在载有翅的载玻片上再用三块小圆盖片(7 mm～10