SN_T 2206.8-2013化妆品微生物检验方法 第8部分：白色念珠菌.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2206.8—2013化妆品微生物检验方法第8部分：白色念珠菌Determination of microbiological in cosmetics-Part 8 :Candida albicans2014-06-01实施2013-11-06 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局有 SN/T 2206.8—2013前言SN/T2206《化妆品微生物检验方法》共分为13部分：第1部分：沙门氏菌；第2部分：需氧芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌；第3部分：肺炎克雷伯氏菌；第 4部分：链球菌;-第5部分：肠球菌；一第6部分：破伤风梭菌;-第7部分：蛋白免疫印迹法检测疯牛病病原;一第8部分：白色念珠菌；第9部分:胆汁酸耐受革兰氏阴性菌;第10部分：金黄色葡萄球菌‧PCR法;-第11部分：金黄色葡萄球菌　多重实时荧光PCR法；第12部分:绿脓杆菌PCR法;第13部分：嗜麦芽窄食单胞菌。本部分为SN/T2206的第8部分。本部分按照GB/T1.1--2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院。本部分主要起草人：吕敬章、万志刚、张恒、汤慕瑾、黄李华、刘慧玲、赵芳、洪小柳、范放、丁晶。 SN/T 2206.8—2013化妆品微生物检验方法第8部分：白色念珠菌1范围SN/T2206的本部分规定了化妆品中白色念珠菌的检测方法。本部分适用于化妆品中白色念珠菌的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T7918.1　化妆品微生物标准检验方法　总则SN/T1538.1培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则SN/T 1538.2培养基制备指南第2部分：培养基性能测试实用指南3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1白色念珠菌Candida albicans又称白假丝酵母菌，广泛存在于自然界的一种条件致病性真菌，也可存在于正常人口腔、上呼吸道、肠道及阴道，一般在正常机体中数量少，不引起疾病，当机体正常菌群失调或抵抗力降低时可致念珠菌病。按照本标准规定的方法进行检测时，白色念珠菌在选择培养基沙氏葡萄糖琼脂表面形成白色至浅褐色、光滑、凸起菌落；白色念珠菌的主要特征表现为可形成芽管、能产生假菌丝和厚膜孢子。3.2厚膜孢子clamydospore孢子在不良环境条件下进人休眠期，菌丝内胞浆浓缩、胞壁增厚而形成的一一种特殊结构，显微镜下表现为菌丝的顶端或短侧枝上孢壁厚、折光性强的大型球形孢子。厚膜孢子仍具有繁殖能力。3.3芽管Germ tube白色念珠菌从酵母相向菌丝相转换中的假菌丝体的早期形态，是白色念珠菌的鉴定依据之一。芽管的形成与白色念珠菌毒力的增强密切相关。4仪器、器具及标准菌株4.1水浴箱:45℃±1℃。4.2温度计:1℃～55℃,分刻度0.1℃。4.3培养箱:36℃±1℃、30℃±1℃。4.4接种环:直径3mm。1 SN/T 2206.8--20134.5天平:感量0.1 g。4.6锥形瓶:100 mL、250 mL、500 mL。4.7试管。4.8培养皿:直径 60 mm、90 mm。4.9过滤器：配0.45 μm的滤膜。4.10显微镜。4.11高压灭菌器。4.12标准菌株：白色念珠菌（ATCC10231）、热带念珠菌（ATCC750)或等效菌株。5培养基和试剂5.1一般要求培养基的质量控制应符合 SN/T 1538.1和 SN/T 1538.2 的要求，也可使用符合 SN/T1538要求的商品化培养基。如果待测样品有抗菌特性，增菌肉汤中应含有中和剂，还应对其中和作用进行验证。5.2主要培养基和试剂5.2.1大豆酪蛋白卵磷脂吐温80液体培养基，也称 SCDLP 液体培养基(SCDLP）:见 A.1.1。5.2.2沙氏葡萄糖氯霉素琼脂：见A.1.2。5.2.3念珠菌显色培养基：见A.1.3。5.2.4　1%吐温80的玉米粉琼脂培养基：见A.1.4。5.2.5胎牛血清或者马血清。5.2.6革兰氏染液。5.3其他培养基见 A.2。6　样品处理待测的样品应在室温下保存，在检测之前和检测完成以后，不要温育、冷藏和冷冻样品。水溶性样品可直接加人增菌液中，非水溶性样品先加人装有一定量助溶剂（如吐温80）的适当容器中，乳化分散样品后，再加人适当体积的增菌液。对可过滤的样品，应使用孔径不大于0.45 um的滤膜，将已准确称量的样品置于带滤膜的过滤器里，过滤后用一定体积的水或稀释液冲洗滤膜